[发明专利]一种高表达病毒的人胚胎肾细胞293及其用途有效
申请号: | 202210471163.2 | 申请日: | 2022-04-28 |
公开(公告)号: | CN114807047B | 公开(公告)日: | 2022-11-15 |
发明(设计)人: | 潘洪辉;喻晓瑜;袁军;胥文彦;谢国豪;吴帆 | 申请(专利权)人: | 中山康天晟合生物技术有限公司 |
主分类号: | C12N5/10 | 分类号: | C12N5/10;C12N5/071;C12N5/073;C12N7/00;C12N15/864 |
代理公司: | 广州科粤专利商标代理有限公司 44001 | 代理人: | 刘明星;朱聪聪 |
地址: | 528437 广东省中*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 表达 病毒 胚胎 细胞 293 及其 用途 | ||
本发明公开了一种高表达病毒的人胚胎肾细胞293及其用途。人胚胎肾细胞293(Wayne293cell line),保藏编号为:CGMCC No.45137。本发明的Wayne 293cell line细胞具有密度高、瞬转效率高、病毒包装滴度高,能够高表达病毒的Wayne 293cell line细胞,最高密度方面可以达到6.7×106Cell/mL,比传统细胞高3×106CELL/mL;瞬转效率达到73%,比传统细胞高21%;病毒包装滴度达到5×1014vg/L,比传统细胞高4×1014vg/L,市场前景广阔。
技术领域:
本发明属于生物技术领域,具体涉及一种高表达病毒的人胚胎肾细胞293及其用途。
背景技术:
动物细胞表达的腺病毒药物销售额迅速增长,作为商业化生产腺病毒的核心技术之一的大规模动物细胞悬浮培养成为腺病毒药物发展的新瓶颈。其中之一主要技术限制就是国内没有自己的高效能商业化动物悬浮培养基,而SIGMA、Invitrogen、Hyclone和Lonza等国际知名培养基,每升高达上千元,且配方保密,不利于后续的培养工艺优化。故研制出自主品牌且低成本的无血清无动物来源培养基,对工艺优化与反应器放大,以满足大量表达基因治疗性病毒的需求,对于病毒药物的产业化的意义是非常重大的。
市场病毒药物70%以上都是由HEK203细胞宿主细胞表达。目前WAYNE293 LVPRO无法高表达病毒,本领域技术人员希望能够获得高表达病毒的WAYNE293 LVPRO细胞。
发明内容:
本发明提供一种Wayne 293cell line细胞,其具有密度高、瞬转效率高、病毒包装滴度高,能够高表达病毒的优点。
本发明的人胚胎肾细胞293(Wayne 293cell line),其于2022年3月28日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC),地址:北京市朝阳区北辰西路1号院3号,中国科学院微生物研究所,邮编:100101,保藏编号为:CGMCC No.45137。
本发明的第二个目的是提供上述Wayne 293cell line细胞在表达病毒中的应用。
优选,所述的病毒是腺病毒。
本发明的第三个目的是提供一种利用Wayne 293cell line细胞表达病毒的方法,其是将病毒转染进入Wayne 293cell line细胞中,使Wayne 293cell line细胞表达病毒。
优选,所述的病毒是腺病毒。
本发明的Wayne 293cell line细胞具有密度高、瞬转效率高、病毒包装滴度高,能够高表达病毒的Wayne 293cell line细胞,最高密度方面可以达到6.7×106Cell/mL,比传统细胞高3×106CELL/mL;瞬转效率达到73%,比传统细胞高21%;病毒包装滴度达到5×1014vg/L,比传统细胞高4×1014vg/L,市场前景广阔。
人胚胎肾细胞293(Wayne 293cell line),其于2022年3月28日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC),地址:北京市朝阳区北辰西路1号院3号,中国科学院微生物研究所,邮编:100101,保藏编号为:CGMCC No.45137
具体实施方式:
以下实施例是对本发明的进一步说明,而不是对本发明的限制。
实施例1:
1、筛选方法:
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