[发明专利]GPLD1蛋白在食蟹猴重复超数排卵应答效果预测中的应用

说明书

本发明属于超数排卵技术领域，通过蛋白质组学分析，成功组超排第一天的GPLD1的表达水平逐次下降，幅度不明显，在失败组中，第二次超排第一天的GPLD1水平较第一次超排第一天骤降，推测食蟹猴超排成功到失败的转变与其相关。哺乳动物GPLD1糖基化磷脂酰肌醇特异性磷脂酶D1参与GPI锚定生物合成途径，并通过从细胞表面释放膜结合的GPI锚定蛋白在细胞分化、粘附和存活等多种细胞过程中发挥关键作用；食蟹猴重复超排程序中，此次超排第一天血浆GPLD1水平较上一次超排第一天水平下降(大于两倍)可能预示此次超排失败，通过对比分析两次超排第一天血浆中GPLD1水平的变化，能够在超排前筛选出可重复超排个体，实现超排高效化，大大节省食蟹猴超数排卵的时间和经济成本。

技术领域

本发明涉及超数排卵技术领域，更具体地，涉及GPLD1蛋白在食蟹猴重复超数排卵应答效果预测中的应用。

背景技术

超数排卵即超排，是指通过人为添加外源性促性腺激素，使动物卵巢内更多的卵泡发育生长，结合人工授精或取卵手术，收集到多于生理数量的胚胎或成熟卵母细胞，是重要的辅助生殖手段，在动物的种群扩繁、生殖力保存等领域广泛应用。食蟹猴在分子进化上十分接近人类，除生理学、解剖学、免疫学以及神经学等方面与人类相似之外，还具有其他动物模型所没有的独特相似性，是生物医学研究中最常用的非人灵长类动物。食蟹猴卵母细胞是一种非常重要的研究材料，但由于食蟹猴一个生殖周期只能产生一个成熟卵母细胞，而生物医学研究中需要大量的优质卵子，从自然周期获取卵母细胞数量远远不能达到实践需求，因此通过超数排卵获取大量优质卵母细胞是满足此类科研和生产需求的不可或缺的关键技术。

食蟹猴超排中存在一种“不应答/应答不良”现象，即对供体母猴给予了一系列外源性促性腺激素刺激后，在取卵手术中并不能获取到或仅能获取个位数量的成熟卵母细胞，且这类食蟹猴再次纳入下次超排程序中也难以再次良好应答，对科研生产有极大的不利影响。一只成年雌性食蟹猴成功超排次数可达6次以上，然而不论是文献还是生产实践中，相当一部分雌猴难以达到此超排次数，多数食蟹猴在一到两次超排后便由于应答不良且难以恢复而被淘汰。超排过程往往投入了巨大的人力物力财力和时间，超排失败则意味着极大的成本损失。因此能够在超排前筛选出适合重复超排的食蟹猴或在超排早期预测超排效果具有重大的意义。

发明内容

本发明为了克服现有技术中存在的上述问题，首先提供了GPLD1蛋白在食蟹猴重复超数排卵应答效果预测中的应用。

本发明的目的通过以下技术方案实现：

GPLD1蛋白在食蟹猴重复超数排卵应答效果预测中的应用。

目前食蟹猴超数排卵供体母猴的筛选主要是通过B超探查母猴的生殖系统，检查子宫和卵巢的健康状况，并结合性激素测定判断其所处的生殖周期且是否与B超结果相符，将生殖系统状况良好的母猴纳入超排猴群。这种方法在超排猴群的建立中是必不可少的，然而卵泡发育的影响因素异质性较大，仅从生殖系统的形态学判断其是否适合纳入超排是不够的，且在重复超排的猴群中，B超检查的准确性相较于首次超排会大打折扣，难以在超排前通过这种方式预测超排效果，只能在某次超排失败后将这些母猴淘汰。目前应用最多的在食蟹猴超排过程中预测超排应答效果的方式为B超检查，在超数排卵的中后期对供体母猴的卵巢进行卵泡发育情况、窦卵泡数量及大小的探查，可以一定程度上预测最终的超排效果，但准确度不高。且由于卵泡发育在超排初期并不明显，难以通过B超探查到卵泡的发育情况，所以目前并没有可靠方法能够在超排程序的初期对取卵日超排效果的预测。食蟹猴的超数排卵程序通常需要对每只供体母猴进行连续10天以上的促性腺激素注射，此过程中会消耗大量的人力和昂贵的激素，若最终超排失败则意味着重大的损失和浪费。因此，如果能够越早预测超排效果则可以越早终止超排程序而减少损失，且有更多时间来调整科研实验计划。