[发明专利]一种细叶朱蕉组培育苗方法及应用

说明书

本发明涉及观赏植物组织培养技术领域，具体来说是一种细叶朱蕉组培育苗方法及应用，包括外植体的选择与消毒、愈伤组织诱导、愈伤组织增殖、愈伤组织分化和丛生芽的生根，本发明是利用组培技术进行细叶朱蕉种苗的生产，属于现代生物技术，是在人工可控环境下进行的工厂育苗，不受气候、季节的限制，可在短期内大量提供相关品质稳定的种苗。

技术领域

本发明涉及观赏植物组织培养技术领域，具体来说是一种细叶朱蕉组培育苗方法及应用。

背景技术

细叶朱蕉(Cordyline stricta)为龙舌兰科朱蕉属多年生植物，原产热带澳洲，是龙舌兰科朱蕉属的主要栽培园艺种之一。细叶朱蕉株形美观，色彩华丽高雅，具有较好的观赏性，是且细叶朱蕉具有极强的耐旱、耐涝、耐阴、耐晒、耐热、耐瘠等抗逆性，常作庭院、公园、绿化带等观赏植物。世纪80年代我国开始引种，现在我国广东、广西、福建、台湾以及云南等热带及亚热带地区有广泛栽培。

由于细叶朱蕉只有在热带地区的老龄植株上才能结籽，使得朱蕉目前繁殖方式为扦插繁殖。但扦插繁殖存在繁殖率低、繁殖周期长、扦插成苗率低等缺点。近年来虽有在龙舌兰科朱蕉属的组培方面有一定的研究报道，但目前还未有细叶朱蕉组培相关的研究报道，而其他朱蕉属组培技术不能应用于细叶朱蕉，因此需要开发一种适用于细叶朱蕉快速繁殖的方法。

发明内容

本发明的目的是针对现有技术的问题，提供一种细叶朱蕉组培育苗方法及应用，以满足细叶朱蕉快速繁殖的需求。

为实现上述目的，本发明采用的技术方案是：一种细叶朱蕉组培育苗方法，包括外植体的选择与消毒、愈伤组织诱导、愈伤组织增殖、愈伤组织分化和丛生芽的生根，具体为：

(1)外植体选择与清洁：选择细叶朱蕉幼嫩心叶为外植体，用滴加2～3滴吐温-80的饱和肥皂水溶液漂洗15～20min，自来水冲淋至无残留后，再用流水冲淋20～30min；

(2)外植体消毒：洗净的外植体转移至超净工作台内，用75％酒精消毒25～30s，无菌水涮洗2～3次，8％双氧水消毒15～20min，无菌水涮洗3～4次，0.05％升汞溶液消毒10～12min，无菌水涮洗6～8次；

(3)愈伤组织诱导：消毒好的外植体用无菌纸吸去表面水分，剪成长2～3cm的小段，接种于WPM+2,4-D 0.5～0.8mg/L+NAA 0.5～0.8mg/L+KT 1.0～1.5mg/L+活性炭0.3g/L的愈伤诱导培养基中，25±2℃暗培养20～30天，后温度不变，每日光照8h、强度1000～2000Lux，光暗交替培养15～20天。

(4)愈伤组织增殖：诱导出愈伤组织，切成1.0cm²的小块，接种于WPM+NAA 0.4～0.6mg/L+CPPU 0.1～0.2mg/L+ZT 0.2～0.4mg/L的愈伤增殖培养基中，25±2℃暗培养15～20天，后温度不变，每日光照8h、强度1000～2000Lux，光暗交替培养10～15天；

(5)愈伤组织分化：愈伤组织切成1.0cm²的小块，接种于改良WPM+NAA0.02～0.05mg/L+6-BA 3.0～4.0mg/L+LFS 0.5～0.6mg/L+BR 0.1～0.2mg/L+土豆泥80～100mg/L的愈伤分化培养基中，25±2℃每日照光12h、强度2000～3000Lux，光暗交替培养50～60天。

(6)丛生芽生根：分化出丛生苗除去基部愈伤，接种在1/2WPM+NAA 0.1～0.3mg/L+IBA 1.0～1.5mg/L+ppp333 0.1～0.2mg/L+活性炭0.5g/L的丛生芽生根培养基中，温度25±2℃，每日光照12h，强度2000～3000Lux，光暗交替培养30～40天。

发明中，改良WPM为在原WPM培养基上，硝酸铵改为600mg/L，硫酸钾改为800mg/L，四水氯化钙改为44mg/L，其余物质不变。