[发明专利]糖化血红蛋白解离液

说明书

本发明公开了一种糖化血红蛋白解离液，包括磷酸盐缓冲液、乙基苯基聚乙二醇、十二烷基硫酸钠和酪蛋白钠。所述解离液可高效解离全血样本中糖化血红蛋白，pH为7.0±0.5条件下进行反应，反应时间短，对后续反应影响小，释放彻底。本发明还公开了包括所述糖化血红蛋白解离液的试剂盒。

技术领域

本发明涉及生物检测领域，特别涉及一种糖化血红蛋白解离液。

背景技术

血红蛋白(Hb)通常由HbA(97％)、HbA2(2.5％)和HbF(0.5％)组成。对HbA进行色谱分析，发现次要血红蛋白HbA1a、HbA1b、HbA1c和HbA0。HbA1a、HbA1b、HbA1c统称为糖化血红蛋白(HbA1)，它们的糖基化位点是β链N末端缬氨酸残基。HbA0是指没有连接糖类的血红蛋白。

糖化血红蛋白是指人体血液中葡萄糖与血红蛋白β链N末端缬氨酸残基以共价键结合的稳定的化合物，全称为血红蛋白β链(血液)-N-(1-脱氧果糖-1-基)血红蛋白β链。HbA1c是糖化血红蛋白的主要组成成分,占总糖化血红蛋白(glycatedHemoglobin,GHb)的60％，目前临床定量测定及应用的是HbA1c结果。HbA1c由葡萄糖的游离醛基与HbA的β链N末端缬氨酸的氨基经非酶促结合反应,先形成不稳定的Schiff碱(醛亚胺),然后经过Amadori(葡糖胺)重排，最后形成稳定的酮胺化合物。

目前糖化血红蛋白解离液有以下几种，但都具有相应的技术缺陷：1)有机溶剂提取法：如使用乙腈提取，其原理是通过相似相溶原理，将糖化血红蛋白溶解到有机相中，使用离心机离心，获取含有糖化血红蛋白的萃取液。在该方法中，糖化血红蛋白解离后需要离心，不便于实现自动化操作；2)酸碱法：依赖较高或较低的pH值，糖化血红蛋白变性或者构象变化被解离释放。该方法获取的维生素D溶液为较高pH或较低pH溶液，不利于下一步发生的免疫反应；3)组合方法。目前较为常用的方法为1％十二烷基三甲基溴化铵、0.1％Tween-80、0.1％Tween-20、0.1％Triton X-100、0.8％氯化铵组合进行解离糖化血红蛋白。该方法含有十二烷基三甲基溴化铵、氯化铵为剧毒物质，具有生物安全性风险。Triton X-100的过度使用会造成环境污染。

因此，获得一种安全、高效、对后续反应影响小的血红蛋白解离液具有重要意义。

发明内容

为解决上述问题，本发明第一方面提供了一种糖化血红蛋白解离液，包括磷酸盐缓冲液、乙基苯基聚乙二醇、十二烷基硫酸钠和酪蛋白钠。

进一步地，所述磷酸盐缓冲液的浓度为10-50mM，所述乙基苯基聚乙二醇的浓度0.3％-1％，所述十二烷基硫酸钠的浓度为0.1％-0.5％，所述酪蛋白钠的浓度为0.3％-1％。

进一步地，所述磷酸盐缓冲液的浓度为20-40mM。

进一步地，所述乙基苯基聚乙二醇的浓度为0.5％-1％。

进一步地，所述乙基苯基聚乙二醇的浓度为0.8％-1％。

进一步地，所述酪蛋白钠的浓度范围为0.5％-1％。

本发明第二方面提供了本发明第一方面所述的糖化血红蛋白解离液在制备试剂盒中的用途。

进一步地，所述试剂盒可用于血液样本中糖化血红蛋白的分离、检测。

本发明第三方面提供了一种试剂盒，所述试剂盒包含本发明第一方面所述的糖化血红蛋白解离液。

与现有技术相比，本发明的有益效果在于：