[发明专利]一种测定烟草中噁霉灵残留物的方法

权利要求书

1.一种测定烟草中噁霉灵残留物的方法，其特征在于，包括如下步骤：

1）清洁：将烟草去除泥土及腐败根叶，烘干至恒重，粉碎，备用；

2）萃取：将步骤1）所得物质加入溶有内标物的提取液中，用氨水调节pH至8-9，涡旋混合振荡，超声提取；

3）分配：向步骤2）混合物中加入哌嗪衍生物、盐，混合至均匀，调节pH至4-6，涡旋混合振荡，离心，留取上清液；所述哌嗪衍生物通过包括如下步骤的方法制得：将醛基吡啶类化合物、哌嗪类化合物、吸水剂加至盛有有机溶剂1的反应釜中搅拌均匀，升温至回流状态，进行反应，反应结束后自然冷却至室温，加入有机溶剂2，过滤，滤渣再次溶于有机溶剂1中进行重结晶，真空干燥即得上述哌嗪衍生物；所述有机溶剂1为甲醇和乙腈的混合溶剂；所述有机溶剂2包括己烷、庚烷中的一种或两种的组合；所述醛基吡啶类化合物和哌嗪类化合物的摩尔比为1:0.8-0.95；所述醛基吡啶类化合物为1-吡啶-3-基-1H-吡咯-2-甲醛；所述哌嗪类化合物为N,N'-二(氨乙基)-哌嗪；有机溶剂1中甲醇体积占比为60-80%；

4）净化：取步骤3）所得上清液加至离心管中，加入盐、净化剂，涡旋混合振荡，离心，留取上清液，过滤，得净化液，备用；

5）衍生：遮光条件下，向步骤4）所得净化液中加入缓冲液调节pH至9-11，加入丹磺酰氯溶液，混合均匀后，室温遮光静置反应，反应结束后加入盐酸甲胺溶液涡旋混匀，静置至不再有沉淀产生，取上清液过滤，备用；

6）检测分析：采用液相色谱-串联质谱法测定噁霉灵衍生物的浓度，保留时间和离子对定性；采用同位素内标法，标准曲线定量；

步骤2）所述提取液为乙腈、端氨基树状大分子溶液的混合物；所述端氨基树状大分子为聚酰胺-胺。

2.如权利要求1所述测定烟草中噁霉灵残留物的方法，其特征在于，步骤2）所述提取液为乙腈、端氨基树状大分子溶液按照体积比为2:0.15-0.25的混合物。

3.如权利要求1所述测定烟草中噁霉灵残留物的方法，其特征在于，步骤2）所述提取液的用量为步骤1）所得烟草重量的2-6倍，所述端氨基树状大分子为3-8代，所述端氨基树状大分子溶液的浓度为3-6wt%，所述端氨基树状大分子溶液的溶剂为甲醇。

4.如权利要求3所述测定烟草中噁霉灵残留物的方法，其特征在于，步骤2）所述内标物为噁霉灵-D3，纯度99.5%，提取液中内标物的浓度为0.005-0.02mg/L。

5.如权利要求1所述测定烟草中噁霉灵残留物的方法，其特征在于，步骤3）所述哌嗪衍生物的添加量为步骤2）所得混合物的5-10wt%，所述盐的添加量为步骤2）所得混合物的20-25wt%，所述盐选自硫酸镁、氯化钠、硫酸钠、醋酸钠、氯乙酸钠中的一种或两种及以上的组合。

6.如权利要求1所述测定烟草中噁霉灵残留物的方法，其特征在于，步骤4）所述上清液、盐与净化剂的重量比为10:1-0.7:1-1.3，所述盐包括硫酸镁，所述净化剂选自乙二胺-N-丙基硅烷、石墨化碳、C18中的一种或两种及以上的组合。

7.如权利要求1所述测定烟草中噁霉灵残留物的方法，其特征在于，步骤5）所述缓冲液的pH为9-11，所述缓冲液包括碳酸钠-碳酸氢钠缓冲液；所述丹磺酰氯溶液的浓度为1-2 g/mL，溶剂为乙腈；所述净化液、丹磺酰氯溶液的体积比为1:0.8-1.3，所述盐酸甲胺溶液的用量为净化液体积的1/10-1/12，所述盐酸甲胺溶液的溶剂为水，浓度为15-25 mg/L。

8.如权利要求1所述测定烟草中噁霉灵残留物的方法，其特征在于，哌嗪衍生物的制备方法中，所述吸水剂选自硫酸镁、氧化钙、硫酸钠中的一种或两种及以上的组合；所述吸水剂的用量为醛基吡啶类化合物、哌嗪类化合物总重的15-25wt%；所述反应时间为6-12h。