[发明专利]融合蛋白、包含该融合蛋白的生物纤维及其制备方法和应用

权利要求书

1.融合蛋白，其特征在于，包括至少一个Resilin嵌段和至少一个ELP嵌段；

所述Resilin嵌段包括(1)～(3)中至少一种：

(1)氨基酸序列如SEQ ID No.1所示的蛋白片段；

(2)在(1)所示的片段中取代、缺失或添加一个或多个氨基酸且与(1)所述的蛋白活性相同或相似的蛋白；

(3)与(1)或(2)所示的氨基酸序列至少有80％同源性的蛋白；

所述ELP嵌段包括(I)～(III)中至少一种：

(I)氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示的蛋白片段；

(II)在(I)所示的片段中取代、缺失或添加一个或多个氨基酸且与(1)所述的蛋白活性相同或相似的蛋白；

(III)与(I)或(II)所示的氨基酸序列至少有80％同源性的蛋白。

2.根据权利要求1所述的融合蛋白，其特征在于，其以m个Resilin嵌段和n个ELP嵌段相连的单元为基础重复单元；其中，m为1～40之间的整数，n为1～200之间的整数。

3.根据权利要求2所述的融合蛋白，其特征在于，所述基础重复单元的个数为4～40个；m等于1，n等于5。

4.权利要求1～3任一项所述的融合蛋白在制备生物纤维中的应用。

5.一种生物纤维，其特征在于，由权利要求1～3任一项所述的融合蛋白和蛋白交联剂经湿法纺丝制得。

6.根据权利要求5所述的生物纤维，其特征在于，所述蛋白交联剂为戊二醛、PEG二醛、乙二醛中的至少一种。

7.根据权利要求5或6所述的生物纤维的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

A)将融合蛋白溶解于超纯水中，获得蛋白溶液；

B)将交联剂和水混合，获得凝固浴纺丝溶液；

C)将所述蛋白溶液添加到凝固浴纺丝溶液中进行湿法纺丝，收集蛋白纤维。

8.如权利要求7所述的制备方法，其特征在于，所述蛋白溶液浓度为100～300mg/mL；所述凝固浴纺丝溶液的质量浓度为0.5～3wt％，溶液pH控制在6.5～8.0之间；

所述蛋白溶液利用液体推进装置进行添加，所述液体推进装置的挤出口内径为100～400μm，所述蛋白溶液的添加速度为5～50μL/min；

所述蛋白溶液流体在凝固浴保持时间为5～20s，收集速度为2～5m/min。

9.一种生物纤维，其特征在于，由权利要求1～3任一项所述的融合蛋白和鲑鱼精DNA制得。

10.权利要求9所述的生物纤维的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

A)将融合蛋白溶解于超纯水中获得蛋白溶液；

B)将鲑鱼精DNA溶解于超纯水中，获得鲑鱼精DNA溶液；

C)将所述蛋白溶液与鲑鱼精DNA溶液混合，震荡混匀后离心，获得蛋白-DNA凝聚物，利用注射器针头匀速挑出凝聚物获得复合纤维。

11.根据权利要求10所述的制备方法，其特征在于，

所述蛋白溶液浓度为100～300mg/mL；

所述鲑鱼精DNA溶液浓度为5～20mg/mL；

所述蛋白溶液中赖氨酸与鲑鱼精DNA中磷酸根的摩尔比为1:1或2:1；

所述挑出凝聚物的速度为30～60cm/min。

12.权利要求1～3任一项所述的重组蛋白、权利要求5或6所述的生物纤维、权利要求7或8所述的制备方法制得的生物纤维、权利要求9所述的生物纤维或权利要求10或11所述的制备方法制得的生物纤维在制备人造肌腱、人工韧带、组织修复材料、组织缺损材料、或伤口修复的材料中的应用。

13.一种组织工程材料，其特征在于，由权利要求5或6所述的生物纤维、权利要求7或8所述的制备方法制得的生物纤维、权利要求9所述的生物纤维或权利要求10或11所述的制备方法制得的生物纤维以及医学领域可接受的助剂制成。