[发明专利]基于金纳米颗粒的传感器及其对谷胱甘肽和其氧化程度的检测方法在审
申请号: | 202210493218.X | 申请日: | 2022-05-07 |
公开(公告)号: | CN115015192A | 公开(公告)日: | 2022-09-06 |
发明(设计)人: | 孙晓环;郭飞;韩杰;郭荣 | 申请(专利权)人: | 扬州大学 |
主分类号: | G01N21/64 | 分类号: | G01N21/64;C09K11/06 |
代理公司: | 北京远大卓悦知识产权代理有限公司 11369 | 代理人: | 史霞;靳浩 |
地址: | 225009 *** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 基于 纳米 颗粒 传感器 及其 谷胱甘肽 氧化 程度 检测 方法 | ||
1.一种金纳米颗粒传感器,其特征在于,是以MPGN为传感平台,以芘磺酸钠为荧光指示获得的,具体制备过程如下:
1)将HAuCl4的水溶液用四辛基溴化铵在N2吹扫的甲苯溶液中进行萃取,在得到的有机溶液中加入二辛胺,随后在N2氛围下搅拌至颜色褪去;
2)待颜色褪去后将溶液冷却至0℃,然后快速加入NaBH4水溶液,保持0℃继续搅拌1~2h;
3)去除步骤2)水层,快速加入含配体C3的甲醇溶液,得到混合物在0℃继续搅拌2.5~3.5h;搅拌完成后将溶剂蒸发,粗产物用甲醇和石油醚洗涤3~5次,干燥,得到表面配体修饰的金纳米颗粒,记为MPGN;
4)配置浓度比为100μM:20μM的MPGN与芘磺酸钠的溶液,得到处于荧光猝灭临界状态的传感器;其中,
所述配体C3的结构式为:
2.如权利要求1所述的金纳米颗粒传感器,其特征在于,所述HAuCl4、四辛基溴化铵、二辛胺、NaBH4、配体C3的摩尔比为1:2.5:20:10:2。
3.如权利要求1所述的金纳米颗粒传感器,其特征在于,所述配体C3的制备过程如下:
1,8-二溴辛烷溶于丙酮中,加入硫代乙酸钾,混合物在室温下氮气保护并搅拌过夜,溶剂挥发后,用CH2Cl2溶解淡黄色固体,用超纯水萃取三次,将有机相旋转蒸发,即得C1;
化合物C1溶于10ml AcN中,加入30%的三甲胺乙醇溶液,在82℃的密封管中反应过夜,将溶剂蒸发后,通过柱色谱对粗产品进行纯化,得到白色晶体;
化合物C2溶于乙醇中,加入6M盐酸,混合溶液在氮气氛围中于70~80℃条件下反应2~4h,溶剂旋转蒸发后所得的白色固体即为C3。
4.一种基于如权利要求1-3中任一项所述的金纳米颗粒传感器检测谷胱甘肽的方法,其特征在于,包括如下步骤:
在所述传感器溶液中加入不同比例的谷胱甘肽,以350nm为激发波长,检测发射波长380nm处的荧光强度,绘制荧光强度与谷胱甘肽浓度之间的线性关系,利用此线性关系对谷胱甘肽进行定量检测。
5.如权利要求4所述的基于金纳米颗粒传感器检测谷胱甘肽的方法,其特征在于,检测时,谷胱甘肽的最终浓度为0μM、10μM、20μM、30μM、40μM、60μM、80μM、100μM、140μM、180μM、250μM、350μM。
6.一种基于如权利要求1-3中任一项所述的金纳米颗粒传感器检测谷胱甘肽氧化程度检测的方法,其特征在于,包括如下步骤:
a)配置不同比例的谷胱甘肽/氧化谷胱甘肽的混合溶液,记为GSH/GSSG的混合溶液;
b)在所述传感器溶液中滴加GSH/GSSG的混合溶液,使其最终浓度为100μM;
c)以350nm为激发波长,检测发射波长380nm处的荧光强度,以F/F0的荧光强度为纵坐标,GSH/GSSG摩尔比为横坐标,绘制标准曲线,以该标准曲线对未知样品谷胱甘肽氧化程度的定量检测。
7.如权利要求6所述的基于金纳米颗粒传感器检测谷胱甘肽氧化程度检测的方法,其特征在于,所述GSH/GSSG的混合溶液中摩尔比GSH:GSSG=1:9,3:7,5:5,7:3,9:1。
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