[发明专利]一种嵌合加帽酶及其制备方法与应用有效
| 申请号： | 202210495574.5 | 申请日： | 2022-05-09 |
| 公开（公告）号： | CN114574466B | 公开（公告）日： | 2022-08-02 |
| 发明（设计）人： | 滕以刚;袁灿灿;王雪琪;郭帅;王小敏;吴浩东;柴常生;惠丰 | 申请（专利权）人： | 翌圣生物科技（上海）股份有限公司 |
| 主分类号： | C12N9/16 | 分类号： | C12N9/16;C12N9/10;C12N9/12;C12N15/70;C12P19/34 |
| 代理公司： | 上海双诚知识产权代理事务所(普通合伙) 31423 | 代理人： | 高利丹 |
| 地址： | 201318 上海市浦*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 嵌合 加帽酶 及其 制备 方法 应用 | ||
【权利要求书】：
1.一种嵌合加帽酶，其特征在于：其蛋白质序列如SEQ ID NO.1所示。
2.一种嵌合加帽酶，其特征在于：其蛋白质序列如SEQ ID NO.2所示。
3.含有权利要求1或2所述嵌合加帽酶的重组表达载体或重组细胞株。
4.权利要求1或2所述嵌合加帽酶的制备方法，其特征在于：包括如下步骤：
（1）制备所述嵌合加帽酶的重组表达载体，接种于2YT培养基中，培养，得到种子液；
（2）取所得种子液接种于2YT培养基中，培养，得到菌液；
（3）向所得菌液中加入IPTG至终浓度为0.1～0.5mM，诱导细胞表达蛋白，离心收集菌体沉淀；
（4）向所得菌体沉淀中加入裂解缓冲液重悬菌体，超声破碎菌体，离心取上清液；
（5）进行镍离子亲和层析，蛋白变性电泳检测各个洗脱峰，收集含有目的蛋白的样品，即获得所述的嵌合体。
5.权利要求1或2所述嵌合加帽酶在mRNA加帽中的应用。
6.利用权利要求1或2所述嵌合加帽酶制备的试剂、试纸或试剂盒。
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