[发明专利]一种鸡DEC-205受体亲和肽DL及其制备方法和应用

说明书

一种鸡DEC‑205受体亲和肽DL及其制备方法和应用，涉及生物医药领域，该鸡DEC‑205受体亲和肽DL，其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。该鸡DEC‑205受体亲和肽DL能特异性结合鸡DEC‑205(CTLD‑4、CTLD‑5、CTLD‑6)重组蛋白，可与鸡骨髓源DCs细胞结合；该鸡DEC‑205受体亲和肽DL相对分子质量小，易于合成、表达和结构修饰；该鸡DEC‑205受体亲和肽DL，可与多种药物输送载体联合使用，可作为药物先导分子和基因导向载体，还可与疫苗联合使用，提高免疫效果，可为细胞特异性小分子治疗奠定基础，对家禽的新型DCs靶向性疫苗的研制与开发提供新思路。

技术领域

本发明涉及生物医药技术领域，具体涉及一种鸡DEC-205受体亲和肽DL及其制备方法和应用。

背景技术

树突状细胞(dendritic cells，DCs)是专职抗原呈递细胞，靶向DCs的生物免疫疗法可将药物有效地输送至相应的部位，减少用药剂量和给药次数，提高药物的治疗效果，降低不良反应。有研究者通过噬菌体环7肽库技术，筛选获得的小鼠骨髓源DCs靶向肽与抗原偶联，制备壳聚糖纳米颗粒疫苗，提高了免疫效率(Su-Na J,Sang-Kee K,Guen-Hye Y,etal.Targeted delivery ofvaccine to dendritic cells by chitosan nanoparticlesconjugated with a targeting peptide ligand selected by phage displaytechnique[J].Macromolecular Bioscience,2015,15(3):395-404.)。

目前，禽靶向性预防与治疗策略尚处于起步阶段。公开号为CN108276476A的中国专利，公开了一种鸡骨髓源树突状细胞靶向肽SP及其用途，该专利利用噬菌体展示线性12肽库技术，对鸡骨髓源DCs进行了全细胞差减筛选，获得鸡骨髓源DCs亲和肽，与抗原融合表达于乳酸菌递送载体中，但提高的免疫效果不持久(公开号：CN108276476A，专利名称：一种鸡骨髓源树突状细胞靶向肽SP及其用途)。将抗原靶向DCs表面的内吞受体是增强获得性免疫反应的新策略。有研究表明将抗鸡DEC-205抗体与高度纯化的禽流感H5N2病毒的血凝素化学偶联，免疫后14天，即产生了强烈的免疫反应，且靶向组鸡产生特异性抗体更早，抗体滴度更高(Jáuregui-Zúiga,David,Pedraza-Escalona M,GP Espino-Solís,etal.Targeting antigens to Dec-205on dendritic cells induces a higher immuneresponse in chickens:Hemagglutinin of avian influenza virus example[J].Research inVeterinary Science,2017,111(Complete):55-62.)。

目前，禽类靶向性疫苗的研发相对滞后，并且鸡骨髓源DCs亲和肽与DCs的结合方式、作用原理尚不明确，提高的免疫效果不持久。另外，鸡DEC-205抗体融合抗原的策略，在抗体化学偶联其它分子时，需考虑二者是否相互影响而改变整体的物理化学性质，且化学偶联方法的选择也较为关键，相关技术要求较高，难度较大。

发明内容

基于此，本发明的目的是提供一种鸡DEC-205受体亲和肽DL及其制备方法和应用，以克服现有技术存在的不足。

本发明为解决技术问题所采用的技术方案如下：

本发明的一种鸡DEC-205受体亲和肽DL，其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。

本发明的一种鸡DEC-205受体亲和肽DL的制备方法，包括以下步骤：

步骤一、pcDNA3.1-DEC 205-Fc-his重组表达质粒的构建