[发明专利]用于识别不同细胞的微流控芯片及其制备方法和检测平台

权利要求书

1.一种检测平台，其特征在于，所述检测平台包括用于识别不同细胞的微流控芯片、锁相放大器（12）和电流放大器（4），三者构成电路回路；所述检测平台包括倒置显微镜成像系统（10），设在倒置显微镜成像系统（10）正下方的阻抗微流控芯片夹具（5）；阻抗微流控芯片夹具（5）上设有用于与微流控芯片中微电极电连的若干外置金属棒，微流控芯片固定在阻抗微流控芯片夹具（5）上且与阻抗微流控芯片的外置金属棒电连；微流控芯片中的微流控管道（2）的进样通道（201）依次连接有压力控制仪（6）、用于存放待检测目标物的储液槽（7）、流量监测单元（8）和用于供气的压缩泵（9），其中流量监测单元（8）还与压力控制仪（6）通过数据线连接；所述检测平台还包括废液收集装置（11），废液收集装置（11）与微流控芯片中的微流控管道（2）的出样通道（205）连接；所述微流控芯片由微流体通道层（1）和玻璃基底层（3）键合而成，微流体通道层（1）具有一微流控管道（2），微流控管道（2）由沿水平轴线依次连通的进样通道（201）、第一收缩结构（202）、主管路通道（203）、第二收缩结构（204）和出样通道（205）构成，其中主管路通道（203）的直径小于进样通道（201）和出样通道（205），第一收缩结构（202）用于将检测样品从大直径的进样通道（201）向小直径的主管路通道（203）引入；第二收缩结构（204）用于将检测样品从小直径的主管路通道（203）向大直径的出样通道（205）引入；玻璃基底层（3）上蒸镀有若干微电极组成的插指微电极（301）；其中玻璃基底层（3）的插指微电极（301）设置在主管路通道（203）的正下方，且插指微电极（301）的电极方向与主管路通道（203）中流体流动方向垂直；其中，第一收缩结构（202）和/或第二收缩结构（204）的宽度是主管路通道（203）的宽度的5-10倍；

利用搭建的检测平台区分不同尺寸的聚苯乙烯微球，包括如下步骤：

（1）阻抗检测微流控芯片的预处理，向微流控芯片中的微流控管道中通入含有5wt%PluronicF127的1×PBS缓冲液，冲洗微流控芯片通道15-30min；

（2）检测频率的优化，对插指微电极之间的目标检测物进行频谱扫描，在锁相放大器的参数设置中，选取了Output1作为输出信号，选定频率扫描的范围为1kHz-10MHz，最终确定的激励信号的频率为10kHz；

（3）聚苯乙烯微球检测样本的制备，采用10×PBS作为悬浮介质；

（4）阻抗检测平台检测参数的设置，将激励电压信号的幅值设定为1V，频率设定为500kHz，跨阻电流放大器的放大倍数设定为1000倍，采样频率设定为224.9Sa/s，将锁相放大器的阻抗检测模式设置为AC与DIFF混合。

2.根据权利要求1所述的检测平台，其特征在于，用于识别不同细胞的微流控芯片中，微流体通道层（1）的长度与玻璃基底层（3）的长度相等，其宽度小于玻璃基底层（3）的宽度，微流体通道层（1）位于玻璃基底层（3）的中央位置，玻璃基底层（3）上的插指微电极（301）的中间部分与微流体通道层（1）接触，其他部分暴露在空气中。

3.根据权利要求2所述的检测平台，其特征在于，用于识别不同细胞的微流控芯片中，主管路通道（203）的尺寸为检测目标物尺寸的0.2-10倍。

4.根据权利要求1所述的检测平台，其特征在于，用于识别不同细胞的微流控芯片中，第一收缩结构（202）和/或第二收缩结构（204）的长度是主管路通道（203）长度的1-5倍。

5.根据权利要求1所述的检测平台，其特征在于，用于识别不同细胞的微流控芯片中，插指微电极（301）中微电极为四对，且插指微电极（301）的体积是检测目标物的体积1-20倍。