[发明专利]固定化酶、其制备方法及应用有效
| 申请号： | 202210511794.2 | 申请日： | 2022-05-12 |
| 公开（公告）号： | CN114606221B | 公开（公告）日： | 2022-09-02 |
| 发明（设计）人： | 洪浩;詹姆斯·盖吉;张娜;罗杰斯卡·维亚撒·威廉姆斯;崔瑜霞;赵佳东;张春月 | 申请（专利权）人： | 凯莱英医药集团（天津）股份有限公司 |
| 主分类号： | C12N11/089 | 分类号： | C12N11/089;C12N9/10;C12N9/20;C12N9/06;C12N9/04;C12N9/02 |
| 代理公司： | 北京康信知识产权代理有限责任公司 11240 | 代理人： | 白雪 |
| 地址： | 300457 天津市*** | 国省代码： | 天津;12 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 固定 制备 方法 应用 | ||
1.一种固定化酶，其特征在于，所述固定化酶包括环氧树脂载体和酶，所述酶与所述环氧树脂载体通过共价键连接，所述环氧树脂载体为LX-109S环氧树脂，所述酶来自于粗酶，选自转氨酶、D-乳酸脱氢酶、环己酮单加氧酶、酮还原酶、烯还原酶、腈水解酶、氨裂解酶、氨基酸脱氢酶、亚胺还原酶、脂肪酶及它们的突变体中的任意一种；所述固定化酶中，每克所述环氧树脂载体上所述酶的负载量为30 mg ~70 mg。
2.根据权利要求1所述的固定化酶，其特征在于，所述氨裂解酶选自苯丙氨酸氨裂解酶中的任意一种。
3.根据权利要求1所述的固定化酶，其特征在于，所述氨基酸脱氢酶选自亮氨酸脱氢酶、苯丙氨酸脱氢酶中的任意一种。
4.根据权利要求1所述的固定化酶，其特征在于，所述固定化酶还包括辅因子。
5.一种权利要求1至4中任一项所述的固定化酶的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括：
步骤S1，将第一磷酸盐缓冲液与酶混合形成缓冲酶液；所述酶为粗酶；
步骤S2，将所述缓冲酶液与环氧基树脂混合进行固定化反应后用第二磷酸盐缓冲液洗涤，得到所述固定化酶，所述环氧树脂为LX-109S环氧树脂。
6.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于，所述缓冲酶液与所述环氧基树脂的体积比为3:1~5:1。
7.根据权利要求6所述的制备方法，其特征在于，所述第一磷酸盐缓冲液的pH值为7.0~8.0，所述第一磷酸盐缓冲液中含有氯化钠，所述第一磷酸盐缓冲液中所述氯化钠的浓度为1±0.2 mol/L；所述第二磷酸盐缓冲液的pH值为7.0~8.0，所述第二磷酸盐缓冲液中不含氯化钠。
8.根据权利要求6所述的制备方法，其特征在于，所述步骤S2包括：
将所述缓冲酶液与环氧基树脂混合在10~20 ℃下混合并进行摇床培养16~24h后在3~5℃静置孵育40~48 h，得到固定化体系；
采用所述第二磷酸盐缓冲液对所述固定化体系进行洗涤，得到所述固定化酶。
9.一种权利要求1至4中任一项所述的固定化酶的应用，所述应用包括将所述固定化酶作为催化剂应用于连续催化反应中。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于凯莱英医药集团（天津）股份有限公司，未经凯莱英医药集团（天津）股份有限公司许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/pat/books/202210511794.2/1.html，转载请声明来源钻瓜专利网。
