[发明专利]莫海威芽孢杆菌YL-RY0310及其培养方法和应用

说明书

本发明提供了一株新分离的莫海威芽孢杆菌(Bacillus mojavensis)YL‑RY0310及其培养方法和应用，所述莫海威芽孢杆菌(Bacillus mojavensis)YL‑RY0310于2022年4月6日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC NO.24646，该莫海威芽孢杆菌在平板对峙试验中显示出对扩展青霉菌生长有较好的抑制作用，同时对展青霉素的合成也有抑制作用，可将其应用于果蔬展青霉素污染的生物防治中。

技术领域

本发明涉及果蔬真菌毒素防控技术领域，具体涉及一株莫海威芽孢杆菌YL-RY0310及其培养方法和应用。

背景技术

中国是全球最大的苹果生产国，产量占全球苹果产量的50％以上，是除瓜类以外我国产量最大的水果品种，在我国水果产业中具有重要地位。然而在苹果的采摘、储藏及运输过程中由扩展青霉(P.expansum)引起的苹果青霉病较为严重，在造成巨大经济损失的同时还在果实体内积累了大量对人体健康有潜在威胁的展青霉素(Patulin，PAT，C₇H₆O₄)。

早在2005年世界卫生组织(WHO)曾报道过PAT是一种基因毒性化合物，WHO和美国食品药品监督管理局(USAFDA)都对食品中PAT的检测含量限定为50μg/kg。由于孕妇及婴幼儿属于暴露在PAT下的高危人群，日本将这一标准提高至10μg/kg，欧盟委员会更是把PAT每日最高容许摄入量限制在0.4μg/kg。我国苹果种植面积及产量虽常年均居世界首位，但出口量却因毒素检出率受到严格的限制。有研究表明在25份的苹果汁样品中发现有8％的样品都检测到展青霉素的存在；陕西的不同加工季节苹果汁样品中展青霉素的污染率到达96.7-100％，其水平约为6.30-8.90μg/kg；近两年又有研究者对我国市场上销售和消费的137种水果产品进行调查，得出被展青霉素污染率为30.7％，其浓度范围从10-276.9μg/kg不等。因此防控展青霉素对果蔬的污染已经成为亟待解决的问题。

化学杀菌剂一直是对防控病菌侵染果实中常用的重要方法，但随着深入研究发现大多数化学杀菌剂都存在潜在致癌的风险，且长期使用还会加剧环境的污染并使病菌产生抗药性。相对来讲，采用安全、环保、高效的生物杀菌剂更为科学、合理和迫切。

发明内容

有鉴于此，本发明的主要目的在于提供一株能抑制扩展青霉菌(P.expansum)生长和高效抑制展青霉素产生的莫海威芽孢杆菌YL-RY0310及其培养方法和应用，具有抑制采后苹果中扩展青霉的生长，同时抑制体内展青霉素产生的效果。

本发明的目的及解决其技术问题是采用以下技术方案来实现的。依据本发明提出的一株莫海威芽孢杆菌(Bacillus mojavensis)YL-RY0310，已于2022年4月6日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC NO.24646。

上述莫海威芽孢杆菌(Bacillus mojavensis)YL-RY0310是首次从新疆和田昆玉244团枣园地的土壤中分离出的，对苹果中扩展青霉菌和展青霉素具有良好抑制效果的生防菌株YL-RY0310，经16S rRNA鉴定为莫海威芽孢杆菌。

本发明的目的及解决其技术问题还可采用以下技术方案来实现。依据本发明提出的一株莫海威芽孢杆菌YL-RY0310的培养方法，包括以下步骤：

将菌株YL-RY0310用接种针接种到NA固体培养基上活化，在25-40℃的培养箱中培养24-48h，用接种针挑取莫海威芽孢杆菌的单菌落，转移至NB液体培养基中，在25-40℃的振荡培养箱中以125-150r/min的速率培养12-24h，吸取液体培养基总体积1-5％的培养液转移至新鲜的NB液体培养基中，在25-40℃下以125-150r/min培养24-72h，获得YL-RY0310发酵液，活菌数达到(1-10)×10⁷CFU/mL。