[发明专利]分离的Cas13蛋白及其应用

权利要求书

1.分离的Cas13蛋白，其特征在于，所述Cas13蛋白包含如SEQ ID NO：1-SEQ ID NO:7、SEQ ID NO:70任一项所示序列；或与SEQ ID NO:1-7、SEQ ID NO:70任一项所示序列具有50％以上序列同一性的序列。

2.根据权利要求1所述的Cas13蛋白，其特征在于，所述Cas13蛋白可与gRNA形成复合物。

3.根据权利要求2所述的Cas13蛋白，其特征在于，所述Cas13蛋白可被gRNA引导至靶核酸。

4.根据权利要求3所述的Cas13蛋白，其特征在于，所述Cas13蛋白可被gRNA引导至靶核酸，并靶向或修饰所述靶核酸。

5.根据权利要求4所述的Cas13蛋白，其特征在于，所述靶核酸是RNA。

6.根据权利要求5所述的Cas13蛋白，其特征在于，所述靶核酸是PTBP1 mRNA、AQp1mRNA、VEGFA mRNA、VEGFR1 mRNA或VEGFR2 mRNA。

7.根据权利要求1所述的Cas13蛋白，其特征在于，所述Cas13蛋白来源于：与包含SEQID NO：1-SEQ ID NO:7、SEQ ID NO:70任一项所示序列的蛋白来源相同的界、门、纲、目、科、属或种。

8.一种分离的Cas13蛋白，其特征在于，所述Cas13蛋白包含以下基序1-15所示氨基酸序列：

基序1：L-x(3)-R-N-x-Y-[ST]-H

基序2：R-x(3)-K-x-[VI]-N-G-F-G-R

基序3：P-Y-[IV]-T-x(5)-Y-x-[IV]-x(2)-N-x-I-G-L

基序4：P-x-L-x(2)-D-x(3)-[NK]

基序5：P-x-[AC]-x-L-S-x(2)-[ED]-[LF]-P-A-x(2)-F

基序6：[LI]-P-x-K-L

基序7：[KT]-x-[AL]-x(2)-[KVE]-[IL]

基序8：A-[DRK]-x-L-x(2)-[DS]-[MI]-[MV]-x-[FW]-Q-P

基序9：K-L-T-x(2)-N

基序10：F-x-[HR]-[AF]-x(5)-[QR]

基序11：I-x-L-P-x-G-[LM]-F-x(3)-I

基序12：[LI]-I-x(2)-[YWF]-F

基序13：I-x(3)-I

基序14：[DN]-[TN]-E-x(2)-[IL]-[KR]-[VR]-Y-[KR]-x-Q-D

基序15：R-N-[SA]-[FA]-x-H-x(2)-Y

其中，A、F、C、U、D、N、E、Q、G、H、L、I、K、O、M、P、R、S、T、V、W、Y为标准氨基酸代码，“x”为任意氨基酸，x后的括号内的数字表示连续的多个x，“[]”内为择一可选氨基酸代码，“-”为分隔符。

9.根据权利要求8所述的Cas13蛋白，其特征在于，所述Cas13蛋白包含如SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:70任一项所示序列，或与SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:70任一项所示序列具有50％以上序列同一性的序列。

10.根据权利要求9所述的Cas13蛋白，其特征在于，所述Cas13蛋白的氨基酸序列中除基序1-15所确定氨基酸以外的任意氨基酸残基，在野生型序列基础上进行氨基酸保守性替换，所述野生型序列包括SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:70所示序列。

11.根据权利要求8所述的Cas13蛋白，其特征在于，所述Cas13蛋白可与gRNA形成复合物。