[发明专利]一种川陈皮素-四面体框架核酸复合物及其制备方法和用途

说明书

本发明提供了一种川陈皮素‑四面体框架核酸复合物及其制备方法和用途，涉及生物医药技术领域。本发明川陈皮素‑四面体框架核酸复合物是由DNA四面体框架核酸和川陈皮素混合后形成的复合物。本发明川陈皮素‑四面体框架核酸复合物具有良好的药物释放速度，可以实现药物缓释，同时生物相容性好，无溶血现象。此外本发明复合物能够很好的被滑膜细胞摄取，可有效抑制滑膜细胞的增殖和迁移，对治疗类风湿性关节炎效果优异。本发明复合物还可以用于缓解骨的缺损破坏，恢复骨质量，促进骨重建，对于骨修复有良好的效果。本发明复合物与游离药物的使用相比，效果更好，促进了川陈皮素应用和发展。

技术领域

本发明涉及生物医药技术领域，具体涉及一种川陈皮素-四面体框架核酸复合物及其制备方法和用途。

背景技术

类风湿性关节炎(Rheumatoid Arthritis，RA)是全身慢性免疫紊乱性疾病，类风湿性关节炎全球发病率较高，特征是关节疼痛、肿胀、僵硬和骨组织和软骨组织破坏，严重者甚至丧失行动能力，造成患者的生活质量严重下降，患者寿命缩短；具体病理特征为对称性的多关节炎，以双手、腕、肘、膝、踝和足关节受累最常见。同时患者可伴有发热、贫血、皮下结节、血管炎、心包炎及淋巴结肿大等关节外表现，血清中可有多种自身抗体，未经正确治疗的类风湿关节炎可反复的发作，迁延多年，最终导致晚期手指、碗、肘、膝、踝等关节变形及功能丧失，手X线片见骨质疏松、关节面破坏及关节腔狭窄。类风湿性关节炎的病理改变主要表现为关节的滑膜炎，随着病情的进展，以后可波及到关节软骨、骨组织、关节韧带、肌腱以及浆膜、心、肺和眼等结缔组织。关节受累表现为滑膜炎症、渗出、细胞增殖、肉芽肿形成，当累及软骨和骨质时造成软骨及骨组织破坏出现关节畸形，最后导致关节强直及功能障碍。

类风湿性关节炎的发病早期由于感染等等原因，T细胞、B细胞激活，产生如类风湿性因子、抗瓜氨酸蛋白抗体等，刺激关节滑膜中的巨噬细胞产生TNF-α、IL-1β等炎症因子，再刺激激活关节滑膜中的滑膜细胞异常增殖，侵袭性增强，滑膜细胞分泌趋化因子、炎症因子、金属蛋白酶，一方面造成关节损伤，另一方面这些炎症因子又再次刺激免疫系统，引发级联反应，加剧病变。滑膜是位于关节腔和纤维囊之间的膜性组织，可分为两层：滑膜衬里层和滑膜衬里下层。滑膜衬里层是由巨噬样细胞和成纤维细胞样滑膜细胞两种，特征各异的细胞构成；衬里下层是由疏松结缔组织基质构成，类风湿性关节炎的关键病理过程以滑膜细胞增生为特征，细胞层数通常超过5层；滑膜内层增生、肥厚及侵袭性增加。由于异常的成纤维样滑膜细胞在类风湿性关节炎发病进程中特点类似肿瘤细胞，故抑制异常活化的滑膜细胞的增殖迁移非常重要。

川陈皮素(Nobiletin)是一种聚甲氧基黄酮，是一种RORs激动剂、碳水化合物代谢促进剂，已被证明具有抗炎和抗癌特性，包括抗血管生成，抗增殖，抗转移和诱导细胞凋亡、以及增强生物钟振幅的效果。文献《川陈皮素抑制IL--21IL--21R介导类风湿关节炎的炎症反应研究》公开了川陈皮素可用于治疗类风湿性关节(苏州大学博士学位论文，刘中兵，2020年)。但是，川陈皮素不溶于水和乙醚，生物利用率低，血浆稳定性差，不具备对组织或细胞的靶向能力，穿透细胞膜的能力极差，难以直接应用体内，实验所需有效药物浓度较高，更难以靶向针对滑膜的调控并应用于治疗类风湿性关节炎。如果能解决上述川陈皮素存在的问题，对于临床治疗类风湿性关节炎有望提供一种新的选择。

四面体框架核酸(tetrahedral framework nucleic acids,tFNAs)又称DNA四面体(tetrahedral DNA，TDN)、四面体DNA纳米结构，它由4条单链DNA通过链间碱基互补配对形成，形态类似四面体。这种纳米结构合成效率高，合成步骤简单，具有良好的生物安全性和生物相容性。DNA四面体框架核酸已是一种研究较为深入的纳米材料，结构具有许多优点，包括可忽略的免疫原性，天然生物相容性，结构稳定性和无与伦比的可编程性，这是有效药物载体的先决条件。同时研究表明DNA四面体具有一定的生物活性，如具有抗炎作用等。因此DNA四面体有望成为一种重要的药物载体。