[发明专利]一种无蛋白质的酶标板封闭稳定剂及其制备方法

说明书

本发明涉及一种无蛋白质的酶标板封闭稳定剂及其制备方法，该酶标板封闭稳定剂包括50‑150g/L蔗糖或三氯蔗糖，10‑50g/L聚蔗糖，0.1‑0.5mL/L表面活性剂，0.1‑1g/L防腐剂。该酶标板封闭稳定剂不含蛋白质，避免了现有的封闭剂中的蛋白质如BSA在检测过程中的干扰作用，可用于食物过敏源和牛源疾病的检测。本发明提供的酶标板封闭稳定剂既具有封闭酶标板的作用，还具有显著提高稳定性的作用，将现有技术中的两步工艺简化为一步，节约了时间和成本，具有广泛的应用前景。

技术领域

本发明涉及生物化学分析技术领域，具体涉及一种无蛋白质的酶标板封闭稳定剂及其制备方法。

背景技术

酶联免疫吸附检测(ELISA)技术在生物化学和分析学领域内得到了广泛的应用，且已经成为临床、科学研究等诸多部门中不可或缺的辅助诊断和检测技术，未来免疫诊断产品的市场需求量将高速增长。

为了保证测定方法的特异性，酶标板的材料不得和参与ELISA反应的其他组分发生反应，酶标板封闭完全对反应的敏感性和特异性非常重要，封闭是确保反应物只能与包被蛋白结合，而不能与平板非特异性结合。最常见有效的封闭液包括牛血清白蛋白和酪蛋白，但在临床医学上对食物过敏源和牛源疾病检测中，含蛋白质的封闭液可能会干扰检测过程中的抗体，导致假阳性结果。因此，非常需要一些蛋白质替代品进行ELISA预包被板的封闭。

另一方面，酶标板中包被的抗原或抗体，在长时间的储存和运输过程中，需要确保抗原或抗体的结构不发生变化和变性，从而避免导致整套试剂盒失效，造成临床结果不准确的结果。因此，诊断试剂的稳定性直接决定着产品的质量，是一个诊断产品在初期研发过程中最需要关注的指标之一。解决酶标板稳定性问题的传统方法是先进行封闭工艺，之后再进行稳定板孔的操作工艺。然而该方法具有步骤繁琐、耗时长的缺点。

因此，本领域亟需开发一种新的酶标板封闭方法，以克服现有技术中存在的缺陷，能够实现对于食物过敏源和牛源疾病的准确检测，并且具有良好的封闭性、稳定性和操作便利性。

发明内容

本发明的目的在于提供一种无蛋白质的酶标板封闭稳定剂及其制备方法，本发明提供的酶标板封闭稳定剂能用于食物过敏源和牛源疾病的检测，并且可显著延长酶标板保存期，提高封闭稳定性。

为此，第一方面，本发明提供一种酶标板封闭稳定剂，其包含50-150g/L蔗糖或三氯蔗糖，10-50g/L聚蔗糖，0.1-0.5mL/L表面活性剂，0.1-1g/L防腐剂；所述酶标板封闭稳定剂不包含蛋白质。

进一步，所述酶标板封闭稳定剂还包括10-100mM碳酸盐缓冲液，pH为9-9.6。

进一步，所述表面活性剂为吐温-20。

进一步，所述防腐剂选自ProClin 300、1,2-苯并异噻唑啉-3-酮中的一种或两种。

在一些实施方式中，所述酶标板封闭稳定剂包含50-100g/L蔗糖或三氯蔗糖，10-50g/L聚蔗糖，0.1-0.5mL/L表面活性剂，0.1-1g/L防腐剂，10-50mM碳酸盐缓冲液，pH为9.6。

进一步，所述酶标板封闭稳定剂中，所述蔗糖或三氯蔗糖的浓度优选为50-100g/L，例如50g/L、60g/L、70g/L、80g/L、90g/L、100g/L等。

进一步，所述酶标板封闭稳定剂中，所述聚蔗糖的浓度选自10g/L、20g/L、30g/L、40g/L、50g/L等。

进一步，所述酶标板封闭稳定剂中，所述表面活性剂的浓度选自0.1mL/L、0.2mL/L、0.3mL/L、0.4mL/L、0.5mL/L等。

进一步，所述酶标板封闭稳定剂中，所述防腐剂的浓度选自0.1g/L、0.2g/L、0.3g/L、0.4g/L、0.5g/L、0.6g/L、0.7g/L、0.8g/L、0.9g/L、1g/L等。