[发明专利]一种具有防控烟草根腐病功能的微生物菌剂及其应用

权利要求书

1.一种具有防控烟草根腐病功能的微生物菌剂，其特征在于，包括以下三株功能菌株复配而成：

所述的三株功能菌株为木霉菌（Trichodermaspp.）WSWFJ-17、枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）WSWFJ-20、解淀粉芽孢杆菌（Bacillus amyloliquefaciens）WSWFJ-19；

木霉菌（Trichodermaspp.）WSWFJ-17保藏号为CGMCC NO.18270、枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）WSWFJ-20保藏号为CGMCC NO.18265、解淀粉芽孢杆菌（Bacillus amyloliquefaciens）WSWFJ-19保藏号为CGMCC NO.18261；

其中两种芽孢杆菌菌粉中有效活菌数均为1×10¹¹cfu/g，木霉菌菌粉中有效活菌数为5×10⁵cfu/g；

将三种菌分别发酵后制备菌粉混合制备菌剂；

枯草芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌和木霉菌的菌粉混合比例为质量比0.5-3:0.5-3:1.3-3.8。

2.根据权利要求1所述的具有防控烟草根腐病功能的微生物菌剂，其特征在于，枯草芽孢杆菌和解淀粉芽孢杆菌菌粉的制备：

将活化培养的种子液按照1‰-5‰的比例接种到发酵罐中的发酵培养液中，在温度为35℃-38℃，转速为100-150rpm/min条件下培养48h-60h，得到发酵液；所述发酵液的有效活菌数大于2.0×10⁷cfu/mL；将发酵液导入离心机中，离心后排除上层菌悬液，得到菌种浓缩液，并使菌种浓缩液中的芽孢杆菌有效活菌数不小于1×10¹⁰cfu/mL；加入辅料，喷雾干燥；

将菌种浓缩液加入搅拌罐中，加入占菌种浓缩液10%～13%的辅料，通过0.8-1.0Pa的压力将所述菌种浓缩液压至旋转喷头，并使喷头保持在转速为18000-22000r/min下喷雾，同时在干燥塔中通入140-160℃、3800-4200m³/h的热风进行干燥，经过喷雾干燥后制得芽孢杆菌有效活菌数不小于1×10¹¹cfu/g的芽孢杆菌微生物菌粉；

所述发酵培养液的组成成分及其重量份数比为：黄豆粉2-4份、蔗糖0.5-1份、牛肉膏1-3份、玉米粉2-3份、碳酸钙0.8-1.5份、鱼粉1-2份、磷酸二氢钾0.05-0.1份、磷酸氢二钾0.05-0.1份、氯化钠1-5份、消泡剂0.1-0.3份，水1000份；采用盐酸、氢氧化钠调节pH至6.8-7.5；

所述喷雾阶段的辅料包括如下重量份的组分：硅藻土55～65份，碳酸钙15～25份，淀粉15～25份。

3.根据权利要求1所述的具有防控烟草根腐病功能的微生物菌剂，其特征在于，木霉菌菌粉的制备：

将活化的菌种体积6‰-7‰的比例接种到液体发酵培养液中，黑暗条件下培养55-75h，温度控制在25-30℃，pH值为6.0-7.0，通气量为200-260m³/h，每小时搅拌1-2次，搅拌时间为10-20min，得到发酵菌液，所述菌液的有效活菌数大于1.0×10¹⁰cfu/mL；按照18-22%的比例将菌液接种到固体培养基中，采用浅盘发酵法进行培养，得到木霉菌，再将木霉菌烘干过筛，得到有效活菌数不小于5×10⁵cfu/g菌粉；

所述的发酵培养液的组成成分为：蔗糖10-80g/L，黄豆粉1-30g/L，硝酸钠0.1-20g/L，磷酸氢二钾0.05-5g/L，硫酸锌0.03-3g/L，硫酸铁0.01-1g/L；

所述的固体培养基的组成成分为：玉米粉1-3份、麸皮1-3份、黄豆粉2-5份、稻壳粉0.5-2份，加入原料重量65%-80%的水；

所述的浅盘发酵的具体步骤：1-5d内温度控制在21-23℃，当温度达到26℃以上时，采用通风、冷藏方法使温度下降至21-23℃，共计发酵天数至少15d。