[发明专利]一种AIE型偶氮酶荧光小分子探针及其制备方法

权利要求书

1.一种AIE型偶氮酶荧光小分子探针，是以三苯胺衍生物为主体发光单元、偶氮基团为特异性识别基团，通过witting-horner化反应缩合制得，具有如下结构式：

其中，R₁为

2.如权利要求1所述的AIE型偶氮酶荧光小分子探针的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

S1：制备三苯胺衍生物

S1-1、咔唑修饰三苯胺衍生物：将4,4′-二溴-4″-甲酰基三苯胺，咔唑衍生物加入到反应瓶中，加入碘化亚铜，将1,10-邻菲罗啉和碳酸钾混合溶解在N,N-二甲基甲酰胺中加入到反应瓶中；氮气保护下加热至160℃反应；反应结束后将反应混合物冷却至室温，倒入冰水中；过滤并干燥，柱层析得固体，即咔唑修饰三苯胺衍生物；

S1-2、联噻吩修饰三苯胺衍生物：将噻吩硼酸酯衍生物和4,4′-二溴-4″-甲酰基三苯胺加入到反应瓶中，加入Pd(PPh₃)₄、碳酸钾和DMF，将混合物在85℃下加热12h；冷却至室温后，加入水，用1N盐酸调整pH值至弱酸度，有黄色固体沉淀；然后通过柱层析提纯得联噻吩修饰三苯胺衍生物；

S1-3、吡啶乙烯基修饰三苯胺衍生物：氮气保护下，向盛有DMF 100mL的双口瓶中加入4-乙烯基吡啶和4,4′-二溴-4″-甲酰基三苯胺，加入醋酸钯、三(邻甲基苯基)膦和无水磷酸钾，磁力搅拌下，油浴加热至120℃反应24h；反应结束后，将反应液滤入无水甲醇中，抽滤，得到淡黄色固体，即吡啶乙烯基修饰三苯胺衍生物；

S2：氮气保护下，将化合物4,4’-二溴甲基偶氮苯溶于100ml亚磷酸三甲酯中，然后缓慢升温到150℃保温36小时，反应结束后，将反应液倒入石油醚中，大量黄色固体析出，减压抽得，干燥，甲醇重结晶得亚磷酸酯修饰偶氮苯衍生物；

S3：氮气保护下，向含有DMF的反应瓶中加入S1-1或S1-2或S1-3制得的化合物以及S2制得的亚磷酸酯修饰偶氮苯衍生物，加入叔丁醇钾,60-120℃加热回流24小时，反应完成后倒入水中，调节pH至弱酸性，抽滤干燥、纯化得深黄色固体；即得AIE型偶氮酶荧光小分子探针。