[发明专利]一种免疫乳剂及其制备方法与在构建脱髓鞘型吉兰-巴雷综合征动物模型中的应用

说明书

本发明提供了一种免疫乳剂及其制备方法与在构建脱髓鞘型吉兰‑巴雷综合征动物模型中的应用，属于动物模型构建技术领域。本发明提供的免疫乳剂，包括0.8‑1.2mg/mL的GalC、0.8‑1.2mg/mL的血蓝蛋白、0.8‑1.2mg/mL的完全弗氏佐剂以及溶剂。采用本发明提供的免疫乳剂免疫日本大耳白兔，可成功建立脱髓鞘型GBS动物模型。且本发明构建的脱髓鞘型GBS动物模型在临床表现、电生理、分子病理方面(尤其是巨噬细胞浸润方面)的特征与人AIDP患者高度一致，为研究GBD/AIDP等脱髓鞘型神经病的发病机制和治疗方案提供了重要的工具，并可以用于特定药物的筛选和测试试验，具有深远的科研意义和重要的应用前景。

技术领域

本发明属于动物模型构建技术领域，尤其涉及一种免疫乳剂及其制备方法与在构建脱髓鞘型吉兰-巴雷综合征动物模型中的应用。

背景技术

吉兰-巴雷综合征(Guillain-Barrésyndrome,GBS)是神经科最常见的、致残疾较重的自身免疫性疾病。GBS的发病机制尚不清楚，一般认为，外来病原体经分子模拟机制诱导人体产生致病性抗体，后者攻击周围神经髓鞘或轴索、继而激活补体并导致膜攻击复合物的形成是GBS发病的基本机制。目前临床治疗GBS的方法主要有血浆置换和静脉用免疫球蛋白(Intravenous immunoglobulin,IVIG)，但临床资料表明仅65％的患者对上述方法有效，约20％的患者在治疗1年后仍遗留有严重的残疾，5％的患者因治疗效果差而死亡，给社会、家庭和个人造成极大的负担。

根据其病理特征的不同，GBS可分为脱髓鞘型和轴索型两种，其中急性炎症性脱髓鞘性多发性神经病(acute inflammatory demyelinating polyneuropathy，AIDP)是最为经典和常见的脱髓鞘型GBS，其致病性抗体为半乳糖苷神经酰胺(galactocerebroside,GalC)的IgG抗体，主要病变是多发神经根和周围神经的运动和感觉神经节段性脱髓鞘，临床表现为急性对称性弛缓性肢体瘫痪，伴或不伴有感觉异常。由于AIDP是一种自身免疫性疾病，自身免疫性抗神经节苷脂IgG抗体与周围神经髓鞘上的神经节苷脂结合后即可引发补体与其恒定区结合，形成膜攻击复合物并损伤周围神经。动物模型是探索GBS/AIDP发病机制和寻找新治疗手段的重要工具。目前对于AIDP的研究尚缺乏公认的动物模型。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的在于提供一种能够用于构建脱髓鞘型吉兰-巴雷综合征动物模型的免疫乳剂，使构建所得的模型在临床表现、电生理、分子病理方面的特征与人AIDP患者高度一致。

为了实现上述发明目的，本发明提供了以下技术方案：

本发明提供了一种免疫乳剂，包括GalC、血蓝蛋白、完全弗氏佐剂以及溶剂，其中GalC的浓度为0.8-1.2mg/mL，血蓝蛋白的浓度为0.8-1.2mg/mL，完全弗氏佐剂的浓度为0.8-1.2mg/mL。

优选的，所述溶剂包括生理盐水。

本发明还提供了一种上述免疫乳剂的制备方法，包括如下步骤：将GalC用体积分数为95％的乙醇溶液溶解后，与生理盐水混合，得溶解液，将溶解液和血蓝蛋白混合，然后与完全弗氏佐剂混匀至乳剂，使GalC、血蓝蛋白和完全弗氏佐剂的终浓度独立地为0.8-1.2mg/mL。

优选的，体积分数为95％的乙醇溶液与GalC的体积质量比为0.1mL：1mg，体积分数为95％的乙醇溶液与生理盐水的体积比为1：4。

本发明还提供了一种上述免疫乳剂或上述制备方法制备所得的免疫乳剂在构建脱髓鞘型吉兰-巴雷综合征动物模型中的应用。

本发明还提供了一种脱髓鞘型吉兰-巴雷综合征动物模型的构建方法，包括如下步骤：用上述免疫乳剂或上述制备方法制备所得的免疫乳剂免疫大耳白兔直至发病。

优选的，用免疫乳剂免疫日本大耳白兔时，按照0.8-1.2mg GalC/只的剂量进行注射免疫。