[发明专利]一种用于币斑病菌检测和物种鉴别的多重PCR反应体系的构建方法及其应用

权利要求书

1.一种基于多重PCR方法检测币斑病菌和鉴别其物种用引物组，其特征在于：所述的币斑病菌物种包含C. jacksonii，C. paspali，C. monteithiana和C. hainanense；所述引物组由针对C. jacksonii特异基因片段的引物对、针对C. paspali特异基因片段的引物对、针对C. monteithiana特异基因片段的引物对、针对C. hainanense特异基因片段的引物对组成；

所述C. jacksonii特异基因序列为如下A）-E）中的任一种：

A)如序列表SEQ ID No：1中的第 1 - 392 位核苷酸所示；

B）如序列表SEQ ID No：1中的第 72 - 376 位核苷酸所示；

C)如序列表SEQ ID No：2中的第 1 - 630 位核苷酸所示；

D）如序列表SEQ ID No：2中的第 260 - 440 位核苷酸所示；

E）如序列表SEQ ID No：3中的第 1 - 1724 位核苷酸所示；

所述C. paspali特异基因序列为如下F）-K）中的任一种：

F）如序列表SEQ ID No：4中的第 1 - 1084 位核苷酸所示；

G）如序列表SEQ ID No：5中的第 1 - 1870 位核苷酸所示；

H）如序列表SEQ ID No：5中的第 1153 - 1514 位核苷酸所示；

I）如序列表SEQ ID No：5中的第 675 - 849 位核苷酸所示；

J）如序列表SEQ ID No：6中的第 1 - 972 位核苷酸所示；

K）如序列表SEQ ID No：7中的第 1 - 268 位核苷酸所示；

所述C. monteithiana特异基因序列为如下L）-P）中的任一种：

L）如序列表SEQ ID No：8中的第 1 - 1124 位核苷酸所示；

M）如序列表SEQ ID No：9中的第 1 - 981 位核苷酸所示；

N）如序列表SEQ ID No：9中的第 581 – 832 位核苷酸所示；

O）如序列表SEQ ID No：9中的第 182 – 544 位核苷酸所示；

P）如序列表SEQ ID No：10中的第 1 – 1763 位核苷酸所示；

所述C. hainanense特异基因序列为如下Q）-U）中的任一种：

Q）如序列表SEQ ID No：11中的第 1 - 2482 位核苷酸所示；

R）如序列表SEQ ID No：11中的第 1391 - 2086 位核苷酸所示；

S）如序列表SEQ ID No：11中的第 1116 - 1403 位核苷酸所示；

T）如序列表SEQ ID No：12中的第 1 - 1598 位核苷酸所示；

U）如序列表SEQ ID No：12中的第 271 - 836 位核苷酸所示；

优选的，

所述C. jacksonii特异基因序列为如下B）、D）中的任一种：

B）如序列表SEQ ID No：1中的第 72 - 376 位核苷酸所示；

D）如序列表SEQ ID No：2中的第 260 - 440 位核苷酸所示；

所述C. paspali特异基因序列为如下H）、I）中的任一种：

H）如序列表SEQ ID No：5中的第 1153 - 1514 位核苷酸所示；

I）如序列表SEQ ID No：5中的第 675 - 849 位核苷酸所示；

所述C. monteithiana特异基因序列为如下N）、O）中的任一种：

N）如序列表SEQ ID No：9中的第 581 – 832 位核苷酸所示；

O）如序列表SEQ ID No：9中的第 182 – 544 位核苷酸所示；

所述C. hainanense特异基因序列为如下R）、S）、U）中的任一种：

R）如序列表SEQ ID No：11中的第 1391 - 2086 位核苷酸所示；

S）如序列表SEQ ID No：11中的第 1116 - 1403 位核苷酸所示；

U）如序列表SEQ ID No：12中的第 271 - 836 位核苷酸所示。