[发明专利]蜡样芽孢杆菌菌剂及在消除动物体内氯氰菊酯中的应用

说明书

本发明所述蜡样芽孢杆菌菌剂，含有蜡样芽孢杆菌(Bacillus cereus)GW‑01。所述蜡样芽孢杆菌(Bacillus cereus)GW‑01，由绵羊瘤胃食糜分离得到，保藏号为CCTCC NO：M2022201。蜡样芽孢杆菌菌剂的制备方法，步骤如下：(1)菌种活化；(2)初级种子液制备；(3)菌种的扩大培养；(4)菌泥和菌剂的制备。实验表明，本发明所述蜡样芽孢杆菌菌剂对动物健康无不良影响，对动物体内残留的氯氰菊酯具有显著的消除效果。将本发明所述蜡样芽孢杆菌菌剂在消除动物体内氯氰菊酯中应用，可减少动物体内残留的氯氰菊酯及其它食物所含的氯氰菊酯通过食物链进入人体，减轻对人体健康的损害。

技术领域

本发明属于微生物开发和应用领域，特别涉及一种蜡样芽孢杆菌菌剂及其在消除动物体内氯氰菊酯中的应用。

背景技术

近年来，随着有机氯和有机磷杀虫剂的部分或全部禁用，拟除虫菊酯类农药的使用量已经占据世界杀虫剂市场的30％。拟除虫菊酯通过开放钠离子通道，实现杀虫目的，因其高效的杀虫能力，使其在农林业生产中发挥重要作用。氯氰菊酯是一种使用最为广泛的拟除虫菊酯类农药，随着其大范围大量使用，导致在茶叶、果蔬、河流和土壤中残留超标的负面影响被不断报道。动物在养殖过程中由于饮水、饲料、圈舍杀虫剂喷洒等问题，杀虫剂往往会在脂肪层中积累，导致动物源性残留物，如肉类、鱼类、脂肪、内脏、鸡蛋和牛奶。残留的氯氰菊酯会通过食物链进入人体，其代谢产物在人体尿液、母乳中普遍检出，其对人体神经系统、生殖系统造成毒性作用，可能引起血液癌症、氧化应激及DNA损伤等危害。近来，由于在动物源性食品中检测出有拟除虫氯氰菊酯类、有机磷类等农药的残留，动物源性食品对人体的健康和生态环境安全问题也引起了全球的关注。因此，如何消除动物体内残留的氯氰菊酯，是亟待解决的问题。

发明内容

本发明的目的在于提供一种蜡样芽孢杆菌菌剂及该菌剂在消除动物体内氯氰菊酯中应用，以减少动物体内残留的氯氰菊酯及其它食物所含的氯氰菊酯通过食物链进入人体造成对人体健康的损害。

本发明所述蜡样芽孢杆菌菌剂，含有蜡样芽孢杆菌(Bacillus cereus)GW-01。所述蜡样芽孢杆菌(Bacillus cereus)GW-01，由绵羊瘤胃食糜分离得到，于2022年3月4日送交中国典型培养物保藏中心保藏，保藏号为CCTCC NO：M 2022201。

本发明所述蜡样芽孢杆菌菌剂，包括蜡样芽孢杆菌菌粉、蜡样芽孢杆菌胶囊或蜡样芽孢杆菌片剂。

本发明所述蜡样芽孢杆菌菌剂的制备方法，步骤如下：

(1)菌种活化

将蜡样芽孢杆菌(Bacillus cereus)GW-01接种于LB固体培养基中进行培养，获得蜡样芽孢杆菌菌株单菌落；

(2)初级种子液制备

将步骤(1)所得蜡样芽孢杆菌菌株单菌落接种于LB液体培养基并放入转动的培养箱中进行培养，得到蜡样芽孢杆菌的初级种子液；

(3)菌种的扩大培养

将步骤(2)中所得蜡样芽孢杆菌的初级种子液接种于LB液体培养基并放入转动的培养箱中进行培养，得到含蜡样芽孢杆菌的培养液；

(4)菌泥和菌剂的制备

将步骤(3)所述培养液进行离心并收集菌体，然后用无菌生理盐水洗涤菌体，再离心去上清，得到含蜡样芽孢杆菌(Bacillus cereus)GW-01的菌泥；将所述菌泥进行冷冻干燥，即得到蜡样芽孢杆菌菌粉；将所述菌粉进行胶囊灌装得到蜡样芽孢杆菌胶囊；将所述菌粉进行片剂压制得蜡样芽孢杆菌片剂。

上述制备方法，其步骤(1)中的培养温度为35～37℃、培养时间为18～24h。