[发明专利]一种诱导高FOXA2表达的细胞的方法

权利要求书

1.一种制备FOXA2+阳性细胞的方法，所述方法包括使用第一培养基、第二培养基、第三培养基中任意一种或多种培养基诱导干细胞；

所述第一培养基中含有以下任意一种成分或多种成分的组合：

1)CHIR99021+GDF-8、

2)CHIR99021+Activin-A+BMP4、

3)CHIR99021+GDF-8+Activin-A+BMP4；

所述第二培养基中含有以下任意一种成分或多种成分的组合：

1)GDF-8、

2)Activin-A+BMP4、

3)GDF-8+Activin-A+BMP4；

所述第三培养基中含有以下任意一种成分或多种成分的组合：

1)FGF-7+抗坏血酸、

2)FGF-7；

优选地，第一培养基中含有CHIR99021+Activin-A+BMP4，第二培养基中含有Activin-A+BMP4，第三培养基中含有FGF-7+抗坏血酸；

优选地，所述CHIR99021浓度的可选范围包括1-5μM，所述GDF-8浓度的可选范围包括50-200ng/ml，所述Activin-A浓度的可选范围包括50-200ng/ml，所述BMP-4浓度的可选范围包括5-40ng/ml，所述抗坏血酸浓度的可选范围包括0.1-0.5mM，所述FGF-7浓度的可选范围包括10-100ng/mL；

优选地，所述CHIR99021浓度为3μM，所述GDF-8浓度为100ng/ml，所述Activin-A浓度为100ng/ml，所述BMP-4浓度为20ng/ml，所述抗坏血酸浓度为0.25mM，所述FGF-7浓度为50ng/mL；

优选地，所述第一培养基、第二培养基、第三培养基的基础培养基中包括MCDB131、碳酸氢钠、谷氨酰胺、葡萄糖、胎牛白蛋白；

更优选地，所述第一培养基、第二培养基、第三培养基的基础培养基是由MCDB131、碳酸氢钠、谷氨酰胺、葡萄糖、胎牛白蛋白组成；

优选地，所述碳酸氢钠浓度的可选范围包括0.5-3g/L，所述谷氨酰胺浓度的可选范围包括0.5-2％，所述葡萄糖浓度的可选范围包括5-20mM，所述胎牛白蛋白浓度的可选范围包括0.1-1％；

优选地，所述碳酸氢钠的浓度为1.5g/L，所述谷氨酰胺的浓度为1％，所述葡萄糖的浓度为10mM，所述胎牛白蛋白的浓度为0.5％。

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述诱导FOXA2+阳性细胞的方法的初始细胞是干细胞；

优选地，所述干细胞是iPSC；

优选地，所述iPSC包括自体细胞或异体细胞；

优选地，所述iPSC细胞包括商品化的细胞系或由供体细胞诱导而来的自制细胞，所述供体细胞包括绒毛细胞、成纤维细胞和角质形成细胞、羊水、胚外组织、脐带血、骨膜、牙组织、脂肪组织、神经干细胞、肝细胞、间质干细胞、外周血细胞、乳腺上皮细胞、脂肪干细胞，脐带基质和胎盘中的一种或多种。