[发明专利]提高菌株抗逆性的方法及基因在提高菌株抗逆性中的应用

权利要求书

1.一种提高菌株抗逆性的方法，其特征在于，包括如下步骤：

将具备抗逆性的菌株和不具备抗逆性的菌株在胁迫条件下培养，培养结束后进行转录组测序，比较具备抗逆性的菌株和不具备抗逆性的菌株的转录组数据，按基因的转录水平进行排序，分析得到显著上调基因；

将所述显著上调基因转入目标菌株，得到能够表达所述显著上调基因的目标菌株。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述具备抗逆性的菌株为酿酒酵母，所述酿酒酵母保藏于中国普通微生物菌种保藏管理中心，保藏编号为CGMCC No.16831。

3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述胁迫条件为：将所述菌株在31-42℃下培养，且培养基中葡萄糖的浓度为2-200g/L。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述显著上调基因为FMP16、YKR075C、DDR2、COA2、UIP4、MCR1、PAI3、SPG1、SIP18中的一种或多种，其中：

基因FMP16具有SEQ ID NO:1所示的核苷酸序列；

基因YKR075C具有SEQ ID NO:2所示的核苷酸序列；

基因DDR2具有SEQ ID NO:3所示的核苷酸序列；

基因COA2具有SEQ ID NO:4所示的核苷酸序列；

基因UIP4具有SEQ ID NO:5所示的核苷酸序列；

基因MCR1具有SEQ ID NO:6所示的核苷酸序列；

基因PAI3具有SEQ ID NO:7所示的核苷酸序列；

基因SPG1具有SEQ ID NO:8所示的核苷酸序列；

基因SIP18具有SEQ ID NO:9所示的核苷酸序列。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，将所述显著上调基因转入目标菌株，得到能够表达所述显著上调基因的目标菌株，具体包括如下步骤：

将所述显著上调基因与启动子、终止子组装得到表达盒，将组装成功的表达盒转化整合到目标菌株的染色体上，通过筛选得到能够表达所述显著上调基因的目标菌株，所述目标菌株为酿酒酵母。

6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，将所述显著上调基因转入目标菌株，得到能够表达所述显著上调基因的目标菌株，具体包括如下步骤：

通过Gibson组装或酶切将所述显著上调基因连接到表达质粒中得到重组载体，将所述重组载体转入目标菌株中，通过筛选得到能够表达所述显著上调基因的目标菌株，所述目标菌株为酿酒酵母或大肠杆菌。

7.一种基因在提高菌株抗逆性中的应用，其特征在于，所述基因为FMP16、YKR075C、DDR2、COA2、UIP4、MCR1、PAI3、SPG1、SIP18中的一种或多种，其中：

基因FMP16具有SEQ ID NO:1所示的核苷酸序列；

基因YKR075C具有SEQ ID NO:2所示的核苷酸序列；

基因DDR2具有SEQ ID NO:3所示的核苷酸序列；

基因COA2具有SEQ ID NO:4所示的核苷酸序列；

基因UIP4具有SEQ ID NO:5所示的核苷酸序列；

基因MCR1具有SEQ ID NO:6所示的核苷酸序列；

基因PAI3具有SEQ ID NO:7所示的核苷酸序列；

基因SPG1具有SEQ ID NO:8所示的核苷酸序列；

基因SIP18具有SEQ ID NO:9所示的核苷酸序列。

8.一种能够表达权利要求7所述基因的菌株。

9.根据权利要求8所述的菌株，其特征在于，所述菌株为酿酒酵母或大肠杆菌。

10.权利要求8或9所述菌株在工业生产中的应用。