[发明专利]atp1b1b基因在海淡水养殖花鲈鉴定中的应用及应用方法

说明书

本申请适用于生物检测技术领域，提供了atp1b1b基因在海淡水养殖花鲈鉴定中的应用及应用方法。atp1b1b作为一种有效的海淡水养殖花鲈鉴定的分子标志物，其鳃组织表达水平与离子转运密切相关；本申请通过检测花鲈鳃组织中atp1b1b基因的表达水平和表达位置，可以快速及准确地区分海淡水养殖的花鲈个体。

技术领域

本申请属于生物检测技术领域，尤其涉及atp1b1b基因在海淡水养殖花鲈鉴定中的应用及应用方法。

背景技术

花鲈(Lateolabrax maculatus)，隶属鲈形目(Perciformes)、鮨科(Serranidae)、花鲈属(Lateolabrax)，俗称鲈鱼，海鲈，是我国重要的海产经济鱼类，也是典型的广盐性鱼类，可以适应0～45‰的盐度范围。然而，研究表明，淡水养殖的花鲈相对于海水腥味更浓，且香味更淡。并且在EPA，DHA以及不饱和脂肪酸等营养成分的含量上，海水养殖花鲈也显著高于淡水养殖花鲈。

故而，对花鲈的海淡水养殖品种进行区分具有重要意义，可以挑选出营养成分更高，更可口的花鲈。但水产品在脱离了生长环境后难以判断来源，故迫切需要开发一种有效且通用的方法来鉴别花鲈的养殖环境。

发明内容

本申请实施例的目的在于提供atp1b1b基因作为分子标记物在海淡水养殖花鲈鉴定中的应用，旨在提供一种有效且通用的方法来鉴别花鲈的养殖环境。

本申请实施例是这样实现的，atp1b1b基因作为分子标记物在海淡水养殖花鲈鉴定中的应用。

本申请实施例的另一目的在于用于鉴定海淡水养殖花鲈的PCR引物，所述PCR引物包括atp1b1b引物与内参引物；其中，

所述atp1b1b引物包括如SEQ ID NO：1所示的正向引物和SEQ ID NO：2所示的反向引物；

所述内参引物为以18s为内参的引物，核苷酸序列如SEQ ID NO：3所示的正向引物和SEQ ID NO：4所示的反向引物。

本申请实施例的另一目的在于用于鉴定海淡水养殖花鲈的原位杂交探针合成特异性引物，所述原位杂交探针合成特异性引物包括如SEQ ID NO：5所示的正向引物和SEQID NO：6所示的反向引物。

本申请实施例的另一目的在于atp1b1b基因作为分子标记物在海淡水养殖花鲈鉴定中的应用方法，包括：

以花鲈鳃组织cDNA为模板，分别用所述的atp1b1b引物与内参引物进行实时荧光PCR扩增，得到每个反应管内的荧光信号到达设定的域值时所经历的atp1b1b循环数与内参循环数；

计算所述atp1b1b循环数与内参循环数的差值，以通过所述差值的范围判断花鲈的养殖环境；

利用所述的原位杂交探针合成特异性引物检测atp1b1b基因在海淡水养殖花鲈鳃组织中的阳性信号位置，以通过所述阳性信号位置判断花鲈的养殖环境。

本申请实施例提供的atp1b1b基因在海淡水养殖花鲈鉴定中的应用，将atp1b1b作为一种有效的海淡水养殖花鲈鉴定的分子标志物，其鳃组织表达水平与离子转运密切相关；本申请通过检测花鲈鳃组织中atplb1b基因的表达水平和表达位置，可以快速及准确地区分海淡水养殖的花鲈个体。

附图说明

图1为本申请实施例中荧光实时定量PCR atp1b1b检测引物的扩增曲线；

图2为本申请实施例中海淡水养殖花鲈个体中atp1b1b的^ΔCt值；

图3为本申请实施例中淡水养殖花鲈个体中atp1b1b的阳性信号和阴性对照参考图；

图4为本申请实施例中海水养殖花鲈个体中atp1b1b的阳性信号和阴性对照参考图。