[发明专利]苹果新品种‘秦脆’和‘秦蜜’的分子身份证构建与品种鉴定方法

权利要求书

1.苹果新品种‘秦脆’和‘秦蜜’的分子身份证构建方法，其特征在于，包括以下步骤：

S1、以‘秦脆’、‘秦蜜’的基因组DNA为模板，采用11对核心SSR引物分别进行PCR扩增，得到扩增产物，所述11对核心SSR引物的序列如SEQ ID NO.1 - 22所示；

S2、对S1中的PCR产物测序并分析统计不同SSR位点的等位基因信息；

S3、将S1的11对核心SSR引物按遗传多态性由高到低排序；

S4、对S2中不同SSR位点的等位基因进行分类标识；具体为将每个SSR位点的等位基因按照分子量从小到大的顺序排列，每个等位基因从0开始依次赋值，若等位基因个数超过9，则从第10个等位基因开始以英文大写字母代替；

S5、按照S3中的SSR引物排序，对‘秦脆’、‘秦蜜’在11个SSR位点上的等位基因信息，按照S4中的等位基因分类标识进行编码和字符串转换，得到的字符串即‘秦脆’、‘秦蜜’的分子身份证。

2.根据权利要求1所述苹果新品种‘秦脆’和‘秦蜜’的分子身份证构建方法，其特征在于，S1中PCR反应体系为：50 ng/ μL的DNA模板0.6 μL，正反向SSR引物各0.8 μL，2 ×SanTaq PCR Mix预混液10 μL，超纯去离子无菌水补充至20 μL；PCR扩增程序为：预变性：94℃ - 3 min；变性：94 ℃ - 40 s；退火：60 ℃ - 50 s；延伸：72 ℃ - 1 min，从变性到延伸设置32个循环；总延伸：72 ℃ - 10 min，最后4 ℃保存。

3.根据权利要求2所述苹果新品种‘秦脆’和‘秦蜜’的分子身份证构建方法，其特征在于，S2具体为采用毛细管电泳法测序和分析‘秦脆’、‘秦蜜’在不同SSR位点的等位基因片段大小，根据毛细管电泳峰图读取等位基因信息，进行基因分型。

4.苹果新品种‘秦脆’和‘秦蜜’的二维码分子身份证构建方法，其特征在于，包括权利要求3的S1 - S5，将S5中所得的字符串，利用二维码生成器生成二维码，即为苹果新品种‘秦脆’和‘秦蜜’的二维码分子身份证。

5.苹果新品种‘秦脆’和‘秦蜜’的分子特异性鉴定方法，其特征在于，包括权利要求3的S1 - S5，将‘秦脆’和‘秦蜜’的分子身份证与待鉴定苹果的分子身份证进行比对，若两者完全一致，则待鉴定苹果是‘秦脆’或‘秦蜜’品种，若不一致，则待鉴定苹果并非‘秦脆’或‘秦蜜’品种；

所述待鉴定苹果的分子身份证的获得方法是：以待鉴定苹果替代‘秦脆’和‘秦蜜’，执行权利要求3的S1 - S5。