[发明专利]一种枸杞耐热性的评价方法

权利要求书

1.一种枸杞耐热性的评价方法，其特征在于：包括以下步骤：

S1：选择不同品种的枸杞样本，分为测评组和对照组；

S2：将测评组内的各组枸杞样本进行热胁迫处理；

S3：将热胁迫处理后的各组枸杞和对照组的各组样本分别进行叶绿素含量分析、可溶性蛋白含量分析、过氧化氢含量分析、丙二醛含量分析；

S4：将测评组内的各组枸杞样本分析结果与对照组各组样本分析结果统计对比，得出耐热性。

2.根据权利要求1所述的一种枸杞耐热性的评价方法，其特征在于：S1中，所述枸杞样本的选择是经过40-50℃温度、1小时处理后得到的花粉活力条件进行选择的。

3.根据权利要求1所述的一种枸杞耐热性的评价方法，其特征在于：S1中，所述对照组为25℃条件下的枸杞样本。

4.根据权利要求1所述的一种枸杞耐热性的评价方法，其特征在于：S2中，所述热胁迫处理条件为42℃、1小时。

5.根据权利要求1所述的一种枸杞耐热性的评价方法，其特征在于：S3中，所述叶绿素含量分析具体为

A1：配制含95％丙酮/乙醇(2:1(V/V))混合液的水溶液为叶绿素提取液；

A2：吸取1mL提取液于1.5mL EP管中，备用；

A3：用液氮研磨叶片至粉末状，称取约100mg叶片组织加入到之前准备好的1.5mL的EP管中，充分混匀，并于黑暗中静置浸提6h；

A4：将提取液于12000r/min离心1min，取上清，测定645nm、663nm的吸光度，分别指示叶绿素A和叶绿素B的浓度；

A5：计算单位质量鲜重叶片所含叶绿素的含量。

6.根据权利要求1所述的一种枸杞耐热性的评价方法，其特征在于：S3中，所述可溶性蛋白含量分析具体为

B1：取新鲜枸杞叶片0.1g，加入1ml蒸馏水研磨，磨成匀浆后用0.6ml蒸馏水冲洗研钵，洗涤液收集在同一离心管中；

B2：在4000rpm下离心10min，弃去沉淀，上清液转入容量瓶，以蒸馏水定容至2ml，摇匀后待测；

B3：吸取样品提取液40μl，放入离心管中(每个样品重复3次)，加入2ml考马斯亮蓝G-250溶液，充分混合，放置2min后在595nm下测定吸光值，蒸馏水调零，考马斯亮蓝G-250溶液做空白对照，测定吸光度，并通过标准曲线计算蛋白质含量。

7.根据权利要求1所述的一种枸杞耐热性的评价方法，其特征在于：S3中，所述丙二醛含量分析具体为

C1：吸取1mL提取液于0.1％TCA(W/V)溶液于1.5mL EP管中，备用；

C2：将叶片充分研磨至粉末状，并称取100mg加入到上述提取液中，充分混匀，置于冰上；

C3：10000×g离心10分钟；

C4：吸取500μL上清于新的10mL离心管中，再加入1mL预冷的试剂(含有TBA(0.25％,W/V)的TCA(20％,W/V)溶液)，混匀；

C5：95℃孵育20min，于冰上冷却后10 000×g离心5min，取上清，测吸光度；

C6：计算单位质量鲜重叶片中的MDA含量。

8.根据权利要求1所述的一种枸杞耐热性的评价方法，其特征在于：S3中，所述过氧化氢含量分析具体为

D1：准备好丙酮60mL、浓盐酸10mL、研钵和冰备用；

D2：制备样品，液氮研磨至粉末状，称取约0.1g，加入1mL丙酮，混匀至匀浆；

D3：8000g、4℃离心10min，取上清，置冰上待测；

D4：4000g，25℃离心10min，弃上清，留沉淀；

D5：加入试剂四溶解沉淀后，室温静置5min，倒入比色皿中，测定415nm处吸光值A，对照管调零，进行计算。