[发明专利]TCR或其抗原结合片段及其应用

说明书

本发明属于T细胞免疫治疗药物技术领域，具体涉及一种T细胞受体(TCR)或其抗原结合片段及其应用，该TCR包含由如SEQIDNO:15或SEQIDNO:30所示序列编码得到的片段。该TCR或其抗原结合片段对KRAS‑G12C突变多肽和KRAS‑G12D突变多肽的识别不明显，但是对KRAS‑G12V突变具有很强的特异性，而且能介导T细胞分泌大量的IFN‑γ细胞因子并杀死发生KRAS‑G12V基因突变的肿瘤细胞。

技术领域

本发明属于T细胞免疫治疗药物技术领域，具体涉及一种TCR或其抗原结合片段及其应用。

背景技术

随着生物医药领域研究的进展，靶向恶性实体瘤的T细胞免疫治疗的靶点选择在不断演变，从最初的谱系抗原变成了病毒抗原，而随着近年来高通量测序技术的出现，靶向肿瘤个体突变成为了新一代T细胞治疗聚焦的靶点。

T细胞治疗目前主要包括TCR-T和CAR-T治疗手段。目前CAR-T技术治疗在白血病、淋巴病瘤等血液瘤的治疗中起到显著效果，大大提高了患者生存率和生存质量，但是针对实体瘤，CAR-T治疗手段由于目前的特异性靶点有限，大大限制了其应用前景。TCR-T技术不同于CAR-T细胞技术，TCR是所有T细胞表面的特征性标志，以非共价键与CD3结合，形成TCR-CD3复合物。外周血中，90％-95％的T细胞表达TCR，经过基因改造的TCR的T细胞，可以对肿瘤细胞表面上的抗原分子进行特异性识别，进而针对肿瘤细胞产生免疫反应。目前，在人类癌症中，KRAS基因为肿瘤学领域最著名的致癌基因之一，KRAS基因突变(KRAS-G12C突变、KRAS-G12D突变、KRAS-G12V突变等)出现在接近90％的胰腺癌中，30％-40％的结肠癌中，17％的子宫内膜癌中，15％-20％的肺癌包括小叶性肺癌中，以及胆管癌、宫颈癌、膀胱癌等。

通过以上所述情况，现需一种可以与KRAS突变多肽特异性结合，并能介导T细胞对KRAS突变的肿瘤细胞进行特异性清除的TCR。

发明内容

本发明目的之一在于提供一种TCR序列，可以靶向特异性识别KRAS-G12V突变位点，与KRAS-G12V突变的多肽与HLA的复合体特异性结合，从而刺激T细胞活化，介导T细胞分泌IFN-γ等细胞因子，进而杀伤表达KRAS-G12V突变的肿瘤细胞。该TCR或其抗原结合片段对KRAS-G12V突变的多肽特异性强，而且能介导T细胞分泌大量的IFN-γ细胞因子。

本发明一方面提供了一种TCR，可以从以下几种TCR进行选择：

第一种：TCR包含α链可变区和β链可变区；α链可变区可以包含如SEQIDNO:3所示序列编码的α链CDR3，β链可变区可以包含如SEQIDNO:6所示序列编码的β链CDR3。

第二种：TCR包含α链可变区和β链可变区，α链可变区可以包含如SEQIDNO:18所示序列编码的α链CDR3；β链可变区可以包含如SEQIDNO:21所示序列编码的β链CDR3。

第三种，可以包含由如SEQIDNO:15或SEQIDNO:30所示序列编码得到的片段。

本发明另一方面提供了一种抗原结合片段，包含上述三种TCR中的任意一种。

本发明再一方面提供了一种多核苷酸，可以从以下几种多核苷酸进行选择：

第一种：可以包含如SEQIDNO:3和SEQIDNO:6所示序列。

第二种：可以包含如SEQIDNO:18和SEQIDNO:21所示序列。

第三种：可以包含如SEQIDNO:15或SEQIDNO:30所示序列。

本发明再一方面提供了一种表达载体，其包含上述三种多核苷酸中任意一种。

本发明再一方面提供了一种工程细胞，其包含上述的表达载体。