[发明专利]一种基于拉曼静默区SERS成像快速检测食品及环境中双酚A的方法

权利要求书

1.一种基于拉曼静默区SERS成像快速检测食品及环境中双酚A的方法，其特征在于，

所述方法的具体步骤如下：

(1)金纳米颗粒的制备

将0.2～0.3mmol/L氯金酸水溶液，加热至沸腾，加入质量分数为0.75～1.25％的柠檬酸水溶液，继续加热搅拌，溶液变为酒红色后，保持加热8～12min后停止加热，待溶液冷却至室温，将其离心浓缩，得到金纳米颗粒；

(2)金纳米颗粒溶液A

向步骤(1)中的金纳米颗粒加入巯基化的BPA aptamer，使得金纳米颗粒与BPA适配体的摩尔比为1：10，于35～38℃水浴孵育1～5h后，加入NaCl溶液，过夜孵育，离心去上清，重悬，得到金纳米颗粒溶液A；

(3)金纳米颗粒溶液B

向步骤(1)中的金纳米颗粒加入巯基化的BPA CS，使得金纳米颗粒与BPA CS的摩尔比为1：10，于35～38℃水浴孵育1～5h后，加入NaCl溶液，过夜孵育，离心去上清，重悬，得到金纳米颗粒溶液B；

(4)金纳米颗粒偶联拉曼信标分子：

在步骤(2)制备的金纳米颗粒溶液A和步骤(3)制备的金纳米颗粒溶液B中，分别加入终浓度为8～12μmol/L信标分子4-MBN，孵育，得到两种金纳米颗粒AuNPs-BPA aptamer-4-MBN和AuNPs-BPA CS-4-MBN；

(5)纳米组装体的组装：

分别取45～55μL步骤(4)得到的两种金纳米颗粒AuNPs-BPA aptamer-4-MBN和AuNPs-BPA CS-4-MBN混匀后，加入终浓度为18～22mmol/L的MgCl₂溶液，35～38℃水浴孵育10～15h，离心后去上清液，重悬，得到纳米组装体；

(6)向步骤(5)中制备的纳米组装体中加入待测样本，混合孵育后测定表面增强拉曼信号；

步骤(6)中，在常温条件下孵育8～12min。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(1)中，所述巯基化的BPA aptamer为：5′-SH-(T)₁₀–CCGGTGGGTGGTCAGGTGGGATAGCGTTCCGCGTATGGCCCAGCGCATCACGGGTTCGCACCA-3′。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(1)中，所述巯基化的BPA CS为5′-SH-(T)10–CCCACCTGACCACCCACCGG-3′。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(2)和步骤(3)中，孵育的条件为35～38℃水浴孵育1～5h；NaCl溶液的终浓度为80～120mmol/L。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(4)中，孵育的条件为35～38℃水浴孵育5～10h。

6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(6)中，通过纳米组装体在静默区的表面增强拉曼信号与BPA浓度的标准曲线计算BPA浓度。

7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，所述标准曲线为y＝-1076.11*lg(x)+1233.95，其中y为2228cm^-1处的拉曼光谱峰信号强度，x为BPA浓度。

8.权利要求1～6任一所述方法在食品和环境领域中的应用。

9.权利要求1～6任一所述方法在检测双酚A中的应用。