[发明专利]覆盆子多糖R2在制备抗肿瘤药物和抗炎制剂中的应用

说明书

本发明公开了覆盆子多糖R2在制备抗肿瘤药物和抗炎制剂中的应用，所述的覆盆子多糖R2由以下步骤制得：取覆盆子干果粉碎、过筛，然后加水加热浸提，将浸提液浓缩和过滤，得覆盆子粗多糖；将覆盆子粗多糖脱蛋白，然后上DEAE琼脂糖凝胶柱，先用去离子水洗脱，再用0.3mol/L的NaCl溶液洗脱，最后用0.4mol/L的NaCl溶液洗脱，直至洗脱液不再含有多糖，合并0.4mol/L的NaCl溶液洗脱液，经透析后，得到覆盆子多糖R2。采用本发明的提取方法不影响覆盆子多糖的生物活性，所得到的多糖纯品在抗肿瘤、抗炎、保湿方面具有显著效果，且细胞毒性试验证明多糖在测试范围内无毒，可进一步用于保健品、药品及化妆品的开发。

技术领域

本发明属于植物活性成分领域，具体涉及覆盆子多糖R2在制备抗肿瘤药物和抗炎制剂中的应用。

背景技术

掌叶覆盆子为蔷薇科悬钩子属藤状灌木，因其叶片(多为五裂或七裂)形似手掌而得名，是一种药食同源植物。

2020版《中国药典》规定：覆盆子(Rubus idaeus L.)为蔷薇科植物华东覆盆子(又称掌叶覆盆子)的干燥果实，具有益肾固精缩尿、养肝明目的作用，可用于治疗遗精滑精、遗尿尿频、阳痿早泄、目暗昏花等证。覆盆子富含维生素A、维生素C、维生素E、17种氨基酸及锌、镁、钙等多种微量元素。覆盆子红熟果的平均可溶性固形物、可溶性总糖、可滴定酸含量分别为13.68％、111.8mg/g和1.27％，不仅含糖量高，风味佳，Vc含量远远高于同期上市的枇杷、杨梅等水果，还富含鞣花酸、山奈酚-3-O-芸香糖苷等活性成分。

在我国，覆盆子在中药制剂和饮食中被长期广泛使用，是珍贵的药食同源物质。历代记载中覆盆子植株缺乏考证，品种不尽相同，以及地理原因，导致覆盆子成分具有差异性，功效不稳定，相关研究较少。目前关于覆盆子生物活性成分的研究还较少，相关药理作用及其机制研究不够深入充分。

发明内容

本发明的目的是提供覆盆子多糖R2在制备抗肿瘤药物和抗炎制剂中的应用，利用水提醇沉法对覆盆子进行多糖提取，并通过离子交换层析法对多糖进行分离纯化，透析冻干，由此提取分离出纯度较高、具有生物活性的多糖组分。

本发明的目的通过下述技术方案实现：

覆盆子多糖R2在制备抗肿瘤药物和抗炎制剂中的应用；

所述的覆盆子多糖R2由以下步骤制得：

(1)取覆盆子干果粉碎、过筛，然后加水加热浸提，将浸提液浓缩和过滤，得覆盆子粗多糖；

(2)将覆盆子粗多糖脱蛋白，然后上DEAE琼脂糖凝胶柱，先用去离子水洗脱至少三个柱体积，再用0.3mol/L的NaCl溶液洗脱3-5个柱体积，最后用0.4mol/L的NaCl溶液洗脱，直至洗脱液不再含有多糖，合并0.4mol/L的NaCl溶液洗脱液，经透析后，得到覆盆子多糖R2；

步骤(1)所述的加热浸提是在80℃下浸提；

步骤(1)所述的过滤是在浓缩液中加入无水乙醇或乙醇溶液，使多糖醇沉后形成棕色絮状沉淀，静置后抽滤，所得沉淀为覆盆子粗多糖；

步骤(2)所述的脱蛋白包括以下步骤：

将覆盆子粗多糖加入超纯水溶解，在冰浴中缓慢加入三氯乙酸溶液，充分混合后静置；接着调pH值至7；5000～10000r/min离心5～10min，去除胶状蛋白沉淀，得多糖滤液；浓缩后加入95％乙醇溶液，不断搅拌使多糖均匀沉淀，随后于4℃下静置8～24h，取出，真空抽滤得沉淀，得到脱蛋白后的覆盆子多糖；

步骤(2)所述的透析包括以下步骤：

将NaCl溶液洗脱液浓缩后转入透析袋中于4℃透析24～96h，去除小分子杂质，透析袋内的保留液含有纯化后的覆盆子多糖R2；

所述透析袋的截留分子量为3000Da。