[发明专利]一种专用内生型菌根微生物肥料制备方法

权利要求书

1.一种专用内生型菌根澧醅液制备方法，其特征在于包括如下步骤：

(1)以重量份为计准备原材料

中药材：辣蓼草150份，桑白皮10份，茯苓皮10份，白附子8份，白芍10份，砂仁15份，黄芪10份，香附8份，豨签草20份，栀子5份，干姜5份，当归5份，肉桂3份，益智仁5份，赤石脂5份，生地10份，黄柏10份；

营养组分：水苏糖20份，甘露醇15份，乙酸钠20份；

发酵用微生物：黑曲霉UV-11-48，根霉，鼠李糖乳酸菌；

(2)原材料处理

新鲜辣蓼草洗净并捣碎备用；

桑白皮、茯苓皮、白附子、白芍、砂仁、黄芪、香附、豨签草、栀子、干姜、当归、肉桂、益智仁、赤石脂、生地和黄柏粉碎并过80目筛备用；

将处理好的中药材采用体积1000份去离子水定容，并在温度为90～95℃搅拌热浴30min，过滤药渣后加入水苏糖、甘露醇和乙酸钠，充分搅拌并再次定容到1000份；

对定容后溶液高温高压灭菌；

(3)微生物接种；

在灭菌后的溶液中接种黑曲霉UV-11-48、根霉和鼠李糖乳酸菌，在29℃恒温下震荡培养72h；然后冷冻降温至4℃，以转速为5400rpm离心分离25min，取上清液，过滤，再次定容1000份，高温高压灭菌；

冷却后保存，保存温度4℃。

2.根据权利要求1所述的一种专用内生型菌根澧醅液制备方法，其特征在于：所述去离子水的导电率大于等于80万欧姆。

3.一种专用内生型菌根微生物肥料制备方法，其特征在于包括如下步骤：

(1)菌种筛选

获取联合固氮菌，在29℃恒温无菌条件下依次对所述联合固氮菌中具有固氮、解钾和溶磷的菌种筛选，筛选合格的联合固氮菌作为菌种；

(2)菌种扩繁

在29℃恒温无菌条件下将菌种依次接入液态固氮解钾菌溶磷混合扩繁培养基、工程固态混合发酵培养基和固态菌根菌肥发酵培养基进行扩繁形成种子液；

所述液态固氮解钾菌溶磷混合扩繁培养基以培养基总体积比计包括蔗糖5.0g/L、蛋白胨2g/L、酵母粉0.4g/L、甘露醇10g/L、NaCl0.2g/L、Na₂HPO₄2.g/L、MgSO₄·7H₂O0.5g/L、MgCl₂0.2g/L、FeCl₃0.005g/L、CaCO₃0.1g/L、KH₂PO₄0.5g/L和K₂HPO₄0.5g/L；

所述工程固态混合发酵培养基以培养基总体积比计包括麸皮95g/L、麦糠5g/L、CaCO₃1g/L、KH₂PO₄0.5g/L、K₂HPO₄0.5g/L、MgSO₄·7H₂O0.5g/L、MgCl₂0.2g/L、FeCl₃0.003g/L；

所述固态菌根菌肥发酵培养基以培养基总体积比计包括米糠97.5g/L、CaCO₃1g/L、K₂HPO₄0.5g/L；

上述培养基的pH值均为7.0～7.5；

(3)菌根肥料基质制备

秸秆粉57份、花椒油提炼干燥废弃物15份、水28份和权利要求1所述制备方法制备的专用内生型菌根澧醅液1份；

秸秆粉和花椒油提炼干燥废弃物粉碎并过80目筛，将粉碎的秸秆粉、花椒油提炼干燥废弃物粉、水和所述专用内生型菌根澧醅液混合均匀，高温蒸汽1.05pa蒸煮60min，冷却至45℃备用；

(4)菌根菌肥生产

无菌环境下，每25份菌根肥料基质接种种子液5份、所述专用内生型菌根澧醅液1份，29℃恒温培养72h后无菌环境下灌装入有单向通气阀的培养袋，常温仓库贮藏。