[发明专利]一种免洗脱、低蛋白吸附纸基核酸提取材料及制备方法和应用

说明书

本发明提供一种免洗脱、低蛋白吸附纸基核酸提取材料及制备方法和应用，包括：将壳聚糖溶液和第一份棉浆搅拌混合，得到混合物1；将聚乙二醇溶液和第二份棉浆搅拌混合，得到混合物2；将混合物1、混合物2和第三份棉浆搅拌混合，抄造成纸，得到免洗脱低蛋白吸附纸基核酸提取材料。该材料可实现核酸简单、快速和高效的提取要求。

技术领域

本发明涉及核酸检测领域，具体涉及一种免洗脱、低蛋白吸附纸基核酸提取材料及制备方法和应用。

背景技术

纸基材料作为一种成本低廉、降解性好、易于修饰改性且可用毛细作用力驱动等优点的多孔材料已被用于快速核酸提取领域。相对于传统核酸提取技术 (例如：离心柱法、磁珠法、酚氯仿抽提法)存在的成本昂贵、不便携、操作复杂、耗时等缺陷，纸基核酸提取技术具有成本低廉、便于携带、操作简单、快速等优点，已被用于从全血、细胞、唾液、细菌等生物样本中提取核酸，但是，提取效率低的缺点限制了其进一步的临床应用。

目前，研究者已采用不同方法改进纸基材料提取效率低的问题。例如：用壳聚糖、聚多巴胺、聚乙烯亚胺对滤纸、硅基膜、Fusion 5进行后改性提升核酸的提取性能。但是，此类方法需要借助额外的试剂、设备、在多步清洗的条件下使核酸吸附量提高和杂蛋白吸附量降低，最终实现核酸的高效提取，导致纸基材料成本昂贵、制备复杂和制备耗时的缺陷，难以满足快速核酸提取简单、快速和高效的要求。因此，研究一种免洗脱低蛋白吸附的纸基核酸提取材料具有重要的意义。

发明内容

为了解决上述现有技术的问题，本发明提供一种免洗脱、低蛋白吸附纸基核酸提取材料及制备方法和应用，该材料可实现核酸简单、快速和高效的提取要求。

本发明通过以下技术方案实现：

一种免洗脱、低蛋白吸附纸基核酸提取材料的制备方法，包括：

将壳聚糖溶液和第一份棉浆搅拌混合，得到混合物1；

将聚乙二醇溶液和第二份棉浆搅拌混合，得到混合物2；

将混合物1、混合物2和第三份棉浆搅拌混合，抄造成纸，得到免洗脱低蛋白吸附纸基核酸提取材料。

优选的：按照第一份棉浆、第二份棉浆和第三份棉浆的总量的绝干质量百分比计，第一份棉浆的绝干、第二份棉浆的绝干和第三份棉浆的绝干的比例为 (20％-80％)：(70％-40％)：(1％-10％)。

优选的：所述第一份棉浆、第二份棉浆和第三份棉浆的打浆度均为40-80 打浆度。

优选的：所述壳聚糖溶液为壳聚糖的水溶液，聚乙二醇溶液为聚乙二醇的水溶液。

优选的：所述搅拌混合的时间为4-12h。

优选的：壳聚糖分子量为2000-50000MW。

优选的：聚乙二醇分子量为400-4000MW。

采用所述的制备方法得到的免洗脱、低蛋白吸附纸基核酸提取材料。

所述的免洗脱、低蛋白吸附纸基核酸提取材料在提取生物样本内核酸中的应用。

优选的：将裂解后的生物样本混合液滴加到所述纸基核酸提取材料上，所述纸基核酸提取材料吸附核酸；之后，将吸附有核酸的纸基核酸提取材料作为模板进行PCR扩增，然后用凝胶电泳对PCR扩增后纸基核酸提取材料进行核酸检测。

与现有技术相比，本发明具有如下的有益效果：