[发明专利]NCgl2747基因突变体及其在制备L-赖氨酸中的应用

说明书

本发明公开了NCgl2747基因突变体及其在制备L‑赖氨酸中的应用。本发明公开的NCgl2747基因突变体为序列表中SEQ ID No.3所示的DNA分子，其编码SEQ ID No.4所示的NCgl2747突变蛋白。本发明发现将NCgl2747基因突变为SEQ ID No.3所示的NCgl2747基因突变体或过表达NCgl2747基因突变体后，有助于L‑赖氨酸产量及生长速率的提高，而对基因进行弱化或敲除，不利于L‑赖氨酸的积累，同时会降低菌株的生长速率。说明，本发明的NCgl2747基因突变体及其编码的NCgl2747突变蛋白可以用于制备L‑赖氨酸，具有很好的应用前景。

技术领域

本发明涉及生物技术领域中，NCgl2747基因突变体及其在制备L-赖氨酸中的应用。

背景技术

L-赖氨酸具有促进发育、增强免疫力和提高中枢神经组织功能等生理功效，是人体和动物不能自身合成且生长必需的8种基本氨基酸之一。目前，L-赖氨酸是世界上的第二大氨基酸品种，主要生产方法是发酵法，其中谷氨酸棒杆菌(Corynebacteriumglutamicum)等是赖氨酸的重要生产菌株。L-赖氨酸工业产量的约90％用作饲料工业中的营养强化剂，10％用作食品工业中的鲜味剂和甜味剂，以及医药行业中的药物中间体。

对发酵法生产L-赖氨酸的改进可以涉及发酵技术如搅拌和供应氧气；或涉及营养培养基的组成，例如发酵过程中的糖浓度；或涉及将发酵液加工成合适的产品形式，例如通过干燥和造粒发酵液或离子交换色谱；或可以涉及相关微生物本身的固有性能性质。

用于改善这些微生物的性能性质的方法包括是诱变、突变体的选择和筛选。以这种方式获得的菌株对抗代谢物具有抗性或对于具有调节重要性的代谢物是营养缺陷型并产生L-赖氨酸。

发明内容

本发明的目的是提供一种可以生产L-赖氨酸的蛋白质与其相关生物材料。

为解决上述技术问题，本发明首先提供了一种蛋白质，该蛋白质名称为NCgl2747^A955T，NCgl2747^A955T为如下A1)或A)：

A1)氨基酸序列是SEQ ID No.4的蛋白质；

A2)在A1)的N端或/和C端连接标签得到的融合蛋白质。

为了使A1)中的蛋白质便于纯化，可在由SEQ ID No.4所示的氨基酸序列组成的蛋白质的氨基末端或羧基末端连接上如下表所示的标签。

表：标签的序列