[发明专利]一种草地贪夜蛾对氯虫苯甲酰胺抗性基因的分子检测方法

权利要求书

1.一种草地贪夜蛾对氯虫苯甲酰胺抗性基因的分子检测方法，其特征在于，所述氯虫苯甲酰胺抗性基因的分子检测方法的具体步骤如下： S1：以待检测草地贪夜蛾基因组DNA为模板，分别选取敏感引物对和抗性引物对草地贪夜蛾基因组DNA进行PCR扩增； S2：采用敏感引物对草地贪夜蛾基因组DNA进行扩增，得到扩增产物A，采用抗性引物对草地贪夜蛾基因组DNA进行扩增，得到扩增产物B； S3：比较扩增产物A和扩增产物B的大小，当扩增产物A大于等于65bp，而扩增产物B小于等于65bp时，则待检测草地贪夜蛾基因型为敏感基因型；S4：比较扩增产物A和扩增产物B的大小，当扩增产物A小于等于65bp，而扩增产物B大于等于65bp时，则待检测草地贪夜蛾基因型为抗性基因型； S5：比较扩增产物A和扩增产物B的大小，当扩增产物A大于等于65bp，而扩增产物B大于等于65bp时，则待检测草地贪夜蛾基因型为混合基因型。

2.根据权利要求1所述的一种草地贪夜蛾对氯虫苯甲酰胺抗性基因的分子检测方法，其特征在于，所述敏感引物对由上游引物A和下游引物A组成，所述上游引物A由下列序列组成：5’-TACTAGACGTCGCTGACG，所述下游引物A由下列序列组成：5’-TGTTTCCCATTATGGGTGAC。

3.根据权利要求1所述的一种草地贪夜蛾对氯虫苯甲酰胺抗性基因的分子检测方法，其特征在于，所述抗性引物对由上游引物B和下游引物B组成，所述上游引物B由下列序列组成：5’-TACTAGACGTCGCTGACG，所述下游引物B由下列序列组成：5’-TGTTTCCCATTATGGGTGAC。

4.根据权利要求1所述的一种草地贪夜蛾对氯虫苯甲酰胺抗性基因的分子检测方法，其特征在于，所述上游引物A和上游引物B的末端第3位和第4位核苷酸引入了错配碱基C和A。

5.根据权利要求1所述的一种草地贪夜蛾对氯虫苯甲酰胺抗性基因的分子检测方法，其特征在于，所述上游引物A的末端第1位核苷酸与突变前的核苷酸一致，所述上游引物B末端第1位核苷酸与突变后的核苷酸一致。