[发明专利]一种GSL防治OP作用机制的研究方法

说明书

本发明公开了一种GSL防治OP作用机制的研究方法，先通过TCMSP和中药与化学成分数据库，获取GSL中淫羊藿、牛膝、黄芪、牡蛎的主要化学成分及其靶点，根据ADME属性值筛选各中药活性成分；再获取OP的主要靶点，进行PPI分析，构建GSL成分靶点－OP靶点核心PPI网络。分析“药物－成分－靶点”及其参与的生物过程及通路，构建“GSL成分－OP靶点－通路”网络，并建立OP动物模型，综合考察骨组织病理变化、骨参数、骨转化标志物的生化水平等指标，评价GSL对OP大鼠的骨保护作用，最后通过WB验证ERα、PI3K、AKT、PPARγ通路上相关蛋白的表达情况，由此全面系统的研究GSL防治OP的作用机制。

技术领域

本发明属于中药药理研究领域，特别涉及一种GSL防治OP作用机制的 研究方法。

背景技术

骨疏灵(GSL)是安徽中医药大学第一附属医院的院内中药复方制剂， 该方是由淫羊藿、牛膝、黄芪和牡蛎四味中药组成，在临床上可用于老年 性、绝经后以及糖尿病性骨质疏松的治疗。虽然药效确切，但其防治骨质 疏松症(OP)的作用机制尚未明确。

目前对中药药效机制的研究，主要是通过调研大量文献，然后选择出 一条通路，再通过蛋白质免疫印迹(WB)等方法去验证。中药为多成分、 多靶点、多途径相互作用的复杂体系，仅仅通过文献调研选择机制通路具 有一定的局限性。复方的主要活性成分及作用机理需借助快速、高效的现 代分析手段来传承和推动中医发展。网络药理学是Hopkins于2007年提出 的，它借助多种学科技术，如系统生物学、计算机医学、分子药理学及药 动学等，全面系统的从分子层面揭示事物本质，其具有的整体性、系统性 等特点与中医药的整体观不谋而合。

有研究通过网络药理学预测中药及相关制剂发挥药效的物质基础及作 用机制，如中国发明专利CN113593717A提出了当归六黄汤治疗溃疡性结肠 炎作用机制的研究方法，具体是先通过中药系统药理学数据库与分析平台 (TCMSP)和Uniprot等数据库分析获得活性成分与疾病的共有靶点；再基 于String构建蛋白质－蛋白质相互作用(PPI)网络，应用Cytoscape软件对 结果进行可视化分析PPI网络中的重要模块和核心靶点；最后采用Metascape对靶点进行基因GO和KEGG通路富集分析，获得成分－靶点－基 因功能－通路－疾病的可视化图形，并对作用机制进行解析。该方法为研究当 归六黄汤治疗溃疡性结肠炎的药物靶点相互作用机理提供了新方法，解决 了多活性成分和多靶点蛋白之间相互作用的数量太大、难筛选的难题。但 该项专利仅仅进行了网络药理学的分析，没有实验验证数据和分析，具体 结果无法确定。

因此，本发明首先利用网络药理学方法结合文献调研探索了GSL防治 OP的分子机制，然后利用绝经后骨质疏松症(PMOP)动物模型进行了药 效和作用机理验证，从中医药整体角度全面系统地研究了GSL防治OP的 作用机制。

发明内容

针对上述问题，本发明公开了一种GSL防治OP作用机制的研究方法， 包括：

利用网络药理学方法结合文献调研构建GSL成分－OP靶点－通路网络，分 析GSL防治OP的作用机制；

建立OP大鼠模型，考察GSL对大鼠各项体征和血清骨转化指标的影响， 评价GSL防治OP的骨保护效果；

通过WB法验证GSL防治OP的作用机制。

进一步地，大鼠各项体征包括大鼠相关器官指数、活体大鼠骨密度、 大鼠骨微结构和大鼠骨组织病理形态；

所述相关器官指数包括大鼠子宫指数。

进一步地，构建GSL成分－OP靶点－通路网络包括以下步骤：

获取GSL成分靶点和OP靶点；

根据GSL成分靶点和OP靶点构建GSL成分靶点－OP靶点PPI网络；