[发明专利]一种用于激活休眠肿瘤细胞的SETD4蛋白抑制剂的投递蛋白

权利要求书

1.一种用于激活休眠肿瘤细胞的SETD4蛋白抑制剂的投递蛋白，其特征在于所述投递蛋白包括投递DEK蛋白，所述投递DEK蛋白为含有DEK蛋白的医学可接受的载体。

2.如权利要求1所述的投递蛋白，其特征在于所述载体包括外泌体、脂质体或纳米材料。

3.如权利要求1所述的投递蛋白，其特征在于所述DEK蛋白具有SEQ ID NO.25所示保守序列。

4.如权利要求3所述的投递蛋白，其特征在于所述DEK蛋白具有SEQ ID NO.2所示NLS结构域的氨基酸序列95％以上相似性。

5.如权利要求3所述的投递蛋白，其特征在于所述DEK蛋白具有SEQ ID NO.3所示SAP结构域的氨基酸序列95％以上相似性。

6.如权利要求3所述的投递蛋白，其特征在于所述DEK蛋白具有SEQ ID NO.4所示pseudo-SAP结构域的氨基酸序列95％以上相似性。

7.如权利要求3所述的投递蛋白，其特征在于所述DEK蛋白具有SEQ ID NO.4所示pseudo-SAP结构域或SEQ ID NO.3所示SAP结构域中的一种或两种，且同时具有SEQ IDNO.2所示NLS结构域。

8.如权利要求3-7之一所述的投递蛋白，其特征在于所述DEK蛋白具有SEQ ID NO.1或SEQ ID NO.22所示氨基酸序列95％以上相似性。

9.如权利要求8所述的投递蛋白，其特征在于所述DEK蛋白具有SEQ ID NO.1所示氨基酸序列。

10.如权利要求8所述的投递蛋白，其特征在于所述DEK蛋白具有SEQ ID NO.22所示氨基酸序列。

11.如权利要求2所述的投递蛋白，其特征在于所述载体为外泌体时，所述投递DEK蛋白是由肿瘤细胞系培养液中分离获得含有DEK蛋白的外泌体，或将DEK蛋白编码基因接入基因表达载体，在细胞系中过量表达DEK蛋白并产生含有DEK蛋白的外泌体。

12.如权利要求11所述的投递蛋白，其特征在于所述将DEK蛋白编码基因接入基因表达载体获得含DEK蛋白的外泌体按如下方法之一制备：(1)构建过表达DEK蛋白的质粒并将其转染到细胞系中制备外泌体：将DEK基因插入到pEGFP-C1质粒的EcoRⅠ和XbaⅠ位点上，筛选获得重组质粒pEGFP-C1-DEK；利用脂质体助转剂lipo8000将上述重组质粒转入细胞系中，过量表达DEK蛋白后收集细胞培养液，从培养液中分离纯化含有DEK蛋白的外泌体溶液A；(2)构建过表达DEK蛋白的慢病毒并将其感染细胞系构建表达DEK蛋白的细胞株制备外泌体：将DEK基因分别插入到pLent-N-GFP的慢病毒表达载体的EcoRⅠ和XbaⅠ位点上，筛选获得重组慢病毒表达载体pLent-N-GFP-DEK；将上述重组慢病毒表达载体和慢病毒包装质粒混合物共同转染293T细胞，转染72小时后收集细胞培养上清即为病毒液，浓缩纯化，获得过表达DEK蛋白的慢病毒；用过表达DEK蛋白的慢病毒感染细胞系并构建过表达DEK蛋白的细胞株；收集过表达DEK蛋白的细胞株中的细胞培养液，从培养液中分离纯化含有DEK蛋白的外泌体溶液B；所述慢病毒包装质粒混合物为质量比5:3:2的pMDL、VSVG和pRSV-Rev。

13.如权利要求11所述的投递蛋白，其特征在于所述细胞系包括乳腺癌、肺癌、胃癌、前列腺癌或宫颈癌。