[发明专利]扑草净半抗原、完全抗原、抗体及制备方法和应用

说明书

本发明提供了一种扑草净半抗原、完全抗原、抗体及制备方法和应用，属于扑草净免疫分析技术领域。本发明提供的扑草净半抗原纯度高，溶解性和稳定性好，与载体蛋白偶联得到的扑草净完全抗原具有抗原性。采用所述扑草净完全抗原免疫宿主动物得到的抗血清或抗体，能够特异性识别扑草净。本发明制备的扑草净完全抗原免疫宿主动物后，能够刺激宿主动物机体产生高灵敏度和特异性好的扑草净抗体。使用本发明提供的扑草净半抗原、完全抗原、抗体及制备方法，可为扑草净的免疫应用提供技术基础，所制备的抗体可用于建立扑草净免疫学检测方法，具有广阔的应用前景。

技术领域

本发明属于扑草净免疫分析技术领域，具体涉及扑草净半抗原、完全抗原、抗体及制备方法和应用。

背景技术

扑草净英文名称为prometryn，化学名称为2-甲硫基-4,6-二(异丙胺基)-1,3,5-三氮苯，又称扑蔓净，割草佳，CAS登记号为7287-19-6，分子式为C₁₀H₁₉N₅S，相对分子量为241.36，化学结构如下所示：

扑草净通过抑制光合电子传递或拦截传递到氧化型辅酶Ⅱ(NADP⁺)的电子，可以抑制植物的光合作用，进而达到除草的目的。这类农药结构稳定，在中性的条件下不会发生水解、降解、生物光解。不合理的扑草净施药方式与施药剂量会造成环境污染与农药残留问题，残留的扑草净可以通过富集作用在食物链中不断传递、迁移，从而对农产品的质量与安全、生态环境造成不良的影响，进而危害人类健康。因此，需对扑草净的残留水平进行监测。

目前已经建立了许多检测环境样品、食品和农产品中扑草净残留的方法。仪器分析方法具有足够的准确性和高度的敏感性，如液相色谱法(LC)、LC-串联质谱法(LC-MS/MS)、气相色谱法(GC)和GC-串联质谱法(GC-MS/MS)均是常用的检测方法。然而，这些仪器分析方法通常需要训练有素的人员、昂贵的仪器、复杂的样品预处理和耗时的分析过程，不适合用于现场对扑草净的残留检测。扑草净的检测方法也有薄层层析法、毛细管电泳方法、分子印记方法等。但这些方法因为其自身的局限性并不常用，如薄层层析法的灵敏度达不到要求，分子印记方法由于稳定性差，重复性不好而难以应用到实际检测中。

免疫分析方法由于其对抗原和抗体的特异性识别作用，具有快速、简便、实时、易于进行现场检测、样品前处理简单、灵敏度高、选择性强、适合于高通量分析等优点，而且能大幅度降低检测成本。因此，制备高灵敏度和特异性的扑草净抗体具有重要意义。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的在于提供一种扑草净半抗原、完全抗原、抗体制备方法及应用，本发明提供的扑草净半抗原能够充分突出抗原决定簇，半抗原与载体蛋白结合后得到完全抗原，该完全抗原表面上具有特征立体结构和免疫活性的化学基团，利用该完全抗原制备的扑草净抗体特异性好，灵敏度高，进而可以用于扑草净的免疫分析检测。

本发明提供了一种结构式如式I所示的扑草净半抗原，所述式I中R₁为连接基团，R₁能够与载体蛋白偶联；