[发明专利]一种人血清琥珀酸检测试剂盒

说明书

本发明公开了一种人血清琥珀酸检测试剂盒，涉及医学检验技术领域。包括试剂R1和试剂R2，所述试剂R1包括第一缓冲液、ATP、CoA、NADH、LDH和LDH激活剂，所述试剂R2包括第二缓冲液、PEP、SCS和PK。应用该检测试剂盒可以实现在全自动生化分析仪上对琥珀酸的测定，可以高通量、快速化、精确地确定样品中的琥珀酸含量，且具有操作简便、灵敏度高、特异性强、稳定性好等优点，有效降低琥珀酸检测成本，有利于临床广泛推广使用。

技术领域

本发明属于医学检验技术领域，涉及一种人血清琥珀酸检测试剂盒。

背景技术

急性主动脉夹层(AAD)是高风险的心血管疾病，目前还没有有效的药物可以预防AAD的发生和发展。巨噬细胞在AAD的发展中起重要作用。而琥珀酸盐会引发巨噬细胞的炎症变化。近日，European Heart Journal杂志发表了北京大学基础医学院心血管研究所郑乐民教授和武汉同济医院汪道文教授两个研究团队合作的研究成果，其中该团队通过代谢组学分析同时结合临床资料发现在AAD患者血浆中琥珀酸水平明显升高，证明琥珀酸可以作为诊断AAD的新型生物标志物，并且揭示了琥珀酸促进AAD进展的机制，通过抑制琥珀酸积累，可以缓解AAD的进展，为AAD提供了新的治疗靶点。

琥珀酸(C₄H₆O₄)分布在所有的植物和动物组织中，最初是从琥珀中提取的。由于其低毒性，广泛应用于农业、食品和制药行业。它是细胞呼吸和细胞内能量产生的最活跃的成分之一。琥珀酸或琥珀酸含量的测定是分析柠檬酸循环的关键。到目前为止，仅有用于动物、食品等的检测试剂盒，还未有应用于人血样本的，这难以满足行业发展的需要。

发明内容

为解决上述技术问题，本发明提供一种人血清琥珀酸检测试剂盒。

本发明是这样实现的，一种人血清琥珀酸检测试剂盒，包括试剂R1和试剂R2，所述试剂R1包括第一缓冲液、ATP、CoA(辅酶a)、NADH、LDH(乳酸脱氢酶)和LDH激活剂，所述试剂R2包括第二缓冲液、PEP(磷酸烯醇式丙酮酸)、SCS(琥珀酰辅酶a合成酶)和PK(丙酮酸激酶)。

进一步地，所述ATP的浓度为0.1～50g/L，所述CoA的浓度为0.3～5g/L，所述NADH的浓度为0.1～10g/L，所述LDH的酶量为0.5～10KU，所述PEP的浓度为0.5～10g/L，所述SCS的酶量为1～50KU，所述PK的酶量为0.5～20KU。

进一步地，所述ATP的浓度为0.9～1.1g/L，所述CoA的浓度为0.9～1.1g/L，所述NADH的浓度为0.9～1.1g/L，所述LDH的酶量为0.9～1.1KU，所述PEP的浓度为1.8～2.2g/L，所述SCS的酶量为9～11KU，所述PK的酶量为4.0～5.0KU。

进一步地，所述第一缓冲液为磷酸盐、三羟甲基甲基甘氨酸、三甲基甘氨酸、N，N-二-羟乙基甘氨酸、N-三羟甲基甲基-3-氨基丙烷磺酸和三羟甲基氨基甲烷中的任意一种，所述第二缓冲液为磷酸盐、3-吗啉丙磺酸、3-N-吗啉基-2-羟基丙磺酸、哌嗪-1，4-羟基二丙磺酸、N-2-羟乙基哌嗪-N-2-乙磺酸和三羟甲基氨基甲烷中的任意一种，所述第一缓冲液和所述第二缓冲液的浓度均为10～100mM。

进一步地，所述试剂R1还包括第一防腐剂，所述第一防腐剂为叠氮钠(NaN₃)、苯甲酸钠和ProClin300中的任意一种，所述试剂R2还包括第二防腐剂，所述第二防腐剂为叠氮钠和ProClin300中的任意一种，所述第一防腐剂和所述第二防腐剂的浓度均为0.1～1g/L。

进一步地，所述LDH激活剂为氯化镁、硫酸镁和碳酸镁中的任意一种或多种，所述LDH激活剂的浓度为1～30mM(mmol/L)。

进一步地，所述试剂R1还包括0.1～5mM的EDTA。