[发明专利]TST1基因在增强马铃薯低温糖化抗性中的应用在审
| 申请号： | 202210640076.5 | 申请日： | 2022-06-08 |
| 公开（公告）号： | CN114891804A | 公开（公告）日： | 2022-08-12 |
| 发明（设计）人： | 刘腾飞;宋波涛;高赛;刘圣宣;刘田田;王恩爽;王进 | 申请（专利权）人： | 华中农业大学 |
| 主分类号： | C12N15/29 | 分类号： | C12N15/29;C12N15/113;C12N15/84;A01H5/04;A01H6/82 |
| 代理公司： | 厦门原创专利事务所(普通合伙) 35101 | 代理人： | 李荣耀 |
| 地址： | 430070 湖*** | 国省代码： | 湖北;42 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | tst1 基因 增强 马铃薯 低温 糖化 抗性 中的 应用 | ||
1.TST1基因在增强马铃薯低温糖化抗性中的应用，其特征在于所述TST1基因CDS序列如序列表SEQ ID No.1所示。
2.马铃薯TST1基因在降低马铃薯块茎还原糖含量中的应用，其特征在于所述TST1基因CDS序列如序列表SEQ ID No.1所示。
3.马铃薯TST1基因在降低马铃薯块茎炸片色泽中的应用，其特征在于所述TST1基因CDS序列如序列表SEQ ID No.1所示。
4.根据权利要求1-3中任何一项所述TST1基因在增强马铃薯低温糖化抗性中的应用，其特征在于通过干涉TST1基因表达提高马铃薯低温糖化抗性抗性，干扰表达所用片段如序列表SEQ ID No.2所示。
5.马铃薯TST1基因植物干涉载体构建方法，包括：马铃薯栽培种E3的cDNA中PCR得到干涉序列，其中，所用PCR引物为所用PCR引物为正向引物：5'—AAAAAGCAGGCTGCAGGGTTGGGATAATGCT—3'；反向引物：5'—AGAAAGCTGGGTTAGGGGGACCAGAGTAACCG—3'；干涉TST1所用序列为序列表SEQ ID No.2所示；将上述PCR产物进行回收。以此为模板，利用通用引物：attBl、attB2，进行第二轮PCR扩增，胶回收产物通过BP反应重组到pDNOR221载体，阳性克隆pDNOR221-TST1通过LR反应重组到pHellsgate8载体，热击转化大肠杆菌DH5α，并测序验证；测序正确阳性克隆pHellsgate8-TST1电击转化农杆菌GV3101,PCR检测为阳性的克隆进行保存，用于进一步的遗传转化。
6.马铃薯TST1基因在增强马铃薯低温糖化抗性中的应用验证方法，包括：(1)马铃薯遗传转化，(2)转基因阳性株系检测，(3)转基因马铃薯块茎低温糖化抗性鉴定。
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