[发明专利]一种甘肃贝母鳞片再分割快繁方法

说明书

本发明是一种利用人工种植甘肃贝母鳞片再分割进行快繁的方法，主要的步骤为a.鳞片再分割包含①鳞茎的优选，②解除休眠，④分瓣，⑤鳞片再分割，⑥再消毒；b.窖藏包含①基质配制，②苗床设置，③储藏；c.小鳞茎分化包含①愈伤组织河沙处理，②小鳞茎基质土移栽；d.大田种植或收获。本发明通过一年培育，将一颗四年生以上甘肃贝母鳞茎分化为10‑48个小鳞茎，突破了四年生以上甘肃贝母大颗鳞茎自然腐烂困境，将人工栽培周期缩短为两年，大幅提高了人工种植产量和效益。

技术领域

本发明涉及濒危稀缺中药材甘肃贝母人工栽培技术，具体涉及一种甘肃贝母鳞片再分割快繁方法。

背景技术

甘肃贝母（F. przewalskii）是珍稀药藏中材川贝母的重要基源植物之一,甘肃贝母中的生物碱主要类型为西贝母碱、贝母辛、贝母素甲、岷贝碱甲、垂茄次碱苷等。根据中医药整合药理学研究平台（TCMIP）统计，以川贝为基源的片剂、糖浆剂、胶囊等药品达195种，市场规模达200亿。2020年甘肃贝母市场年需求量在5×104 kg，需求规模达36亿，而野生甘肃贝母的年产量不到1×104 kg，目前还有30亿的市场缺口。由于甘肃贝母野生储量日渐稀少，1988 年被纳入《国家重点保护野生植物名录》，2015年工业和信息化部等部门发布的《中药材保护和发展规划（2015—2020年）》明确提出要建设甘肃贝母等濒危稀缺中药材种植基地，2021年列为二级国家重点保护野生植物。

在甘肃贝母的人工种植中，种子繁殖周期长、鳞茎繁殖产量低、组织快繁技术不成熟、通过鳞片单片繁殖的方法对甘肃贝母较强的无性生殖能力挖掘不够。此外，甘肃贝母人工种植四年生以上鳞茎不仅会自然腐烂，而且因其直径多为30mm以上，相比野生甘肃贝母形态等效性低，市场竞争力下降，严重制约了甘肃贝母的规模化人工种植。甘肃贝母鳞片再分割快繁方法可以实现大幅增产，并且有效利用了四年生以上大鳞茎，为人工规模化种植甘肃贝母奠定了基础。

发明内容

一种甘肃贝母鳞片再分割快繁方法，其步骤包括：

1、鳞片再分割

①鳞茎的优选

通过筛子选取直径15mm以上饱满白净鳞茎，剔除黄化、霉化鳞茎，除去附着在鳞茎上的泥土、根毛；

②解除休眠

置于40-50℃温水中浸泡40-60min,然后用流速1.5m/s、温度5-10℃自来水冲洗20-40min；

③消毒

在浓度为1%的高锰酸钾溶液中浸泡30min,沥干后在浓度为50%的多菌灵550倍稀释液中浸泡30min；

④分瓣

从鳞茎盘依次剥离外围两片大鳞片，将完整大鳞茎剥离为两个鳞片和一个心芽三部分，鳞茎盘可以连在心芽上，也可以直接和心芽剥离丢弃，在无菌水中冲洗2-5次，再用无菌吸水纸将表面水分吸干；

⑤鳞片再分割

用消毒后的解剖刀将分瓣后的鳞片分割，将鳞片依垂直于鳞片面和鳞茎盘方向竖直切割为平均两半，再将每一切割后的鳞片部分横向均分为两半，长度超过16mm鳞芽可以横向均分割为两部分，最后一个鳞片可以再分割为四部分，一个鳞茎在分割后成为9-10部分；

⑥再消毒

用波长范围为2300-2550A的紫外线将切割后的鳞片和鳞芽照射10-25min消毒处理。

2、窖藏

①河沙基质配制

将直径为0.1-1mm的细河沙和直径为1-2mm粗河沙按照1:1比例混合，然后装入布袋封口，于100KPa以上高压锅灭菌锅中消毒15-30min，冷却后自然风干至河沙湿度为40%；

②苗床设置