[发明专利]一种当归建中汤全方六药味的薄层鉴别方法

权利要求书

1.一种当归建中汤全方六药味的薄层鉴别方法，其特征在于，包括以下步骤：

S1、供试品溶液制备

取相当于5g总饮片量的当归建中汤和水混合，加热使溶解，放冷，转移至分液漏斗中，用乙醚萃取，合并乙醚液，挥干，残渣加甲醇溶解，得到乙醚层供试品溶液；将水层通过AB-8大孔吸附树脂柱，用氨水溶液洗脱，弃去洗脱液，再用水洗脱，弃去洗脱液，继续用乙醇溶液洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加甲醇溶解，得到水层供试品溶液；

S2、混合对照品溶液1的制备

取甘草苷对照品和芍药苷对照品，用甲醇制成含有甘草苷对照品和芍药苷对照品各含0.5mg/ml的混合对照品溶液，混匀，得到混合对照品溶液1；

S3、水层对照药材溶液的制备

取大枣对照药材，白芍对照药材，甘草对照药材，分别和水混合，回流提取，趁热过滤，放凉，滤过，滤液通过AB-8大孔吸附树脂柱，用氨水溶液洗脱，弃去洗脱液，再用水洗脱，弃去洗脱液，继续用乙醇溶液洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加甲醇使溶解，得到水层对照药材溶液；

S4、薄层色谱试验

吸取水层供试品溶液、甘草对照药材溶液、白芍对照药材溶液和大枣对照药材溶液各10ul，混合对照品溶液1吸取5ul，点于同一硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-甲醇-水-氨水混合溶液为展开剂进行展开，所述乙酸乙酯-甲醇-水-氨水混合溶液中乙酸乙酯、甲醇、水和氨水的体积比为20:4:2:0.5，晾干，喷于磷钼酸硫酸溶液，在105℃加热至斑点显色清晰，水层供试品色谱中，在与芍药苷对照品、甘草苷对照品和甘草对照药材、白芍对照药材、大枣对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；

S5、混合对照品溶液2的制备

取6-姜辣素对照品、肉桂酸对照品和藁本内酯对照品，用甲醇制成各含0.2mg/ml的混合对照品溶液，混匀，得到混合对照品溶液2；

S6、乙醚层对照药材溶液的制备

取当归对照药材，肉桂对照药材适量，分别和水混合，加热回流提取，趁热过滤，滤液转移至分液漏斗中，用乙醚萃取，合并乙醚液，挥干，残渣加甲醇溶解，得到乙醚层对照药材溶液；

S7、薄层色谱法试验

吸取乙醚层供试品溶液、当归对照药材、肉桂对照药材溶液各20ul，混合对照品溶液2吸取5ul，分别点于同一硅胶G薄层板上，以环已烷-二氯甲烷-甲酸混合溶液为展开剂进行展开，所述环已烷-二氯甲烷-甲酸混合溶液中环已烷、二氯甲烷和甲酸的体积比为4:2:0.1，晾干，于254nm下观察，供试品色谱中，在与肉桂酸和肉桂对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；于365nm下观察，在与藁本内酯对照品和当归对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；再喷以香草醛硫酸试液，置于105℃烘至斑点显色，日光下，供试品色谱中，在与6-姜辣素对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。

2.根据权利要求1所述的当归建中汤全方六药味的薄层鉴别方法，其特征在于，所述步骤S1中乙醚萃取过程为：加入乙醚振摇提取2～3次，每次加入量为样品水溶液体积的1倍。

3.根据权利要求1所述的当归建中汤全方六药味的薄层鉴别方法，其特征在于，所述步骤S1和S3中的氨水溶液为体积浓度1～5％。

4.根据权利要求1所述的当归建中汤全方六药味的薄层鉴别方法，其特征在于，所述步骤S1和S3中的乙醇溶液洗脱的体积浓度为40％。

5.根据权利要求1所述的当归建中汤全方六药味的薄层鉴别方法，其特征在于，所述步骤S1和S3中氨水溶液、水和乙醇溶液洗脱用量的体积比为3:2:5。

6.根据权利要求1所述的当归建中汤全方六药味的薄层鉴别方法，其特征在于，所述步骤S4中磷钼酸硫酸溶液由磷钼酸2g，加水20ml使溶解，再缓缓加入硫酸30ml，混匀制备得到。