[发明专利]一种三倍体翘嘴鲌的培育方法

说明书

一种三倍体翘嘴鲌的培育方法，属于鲌亚科鱼类育种技术领域。为了解决性腺发育会影响了翘嘴鲌生长和肉质，降低鱼的商品质量的问题，结合三倍体翘嘴鲌三倍化的比例，确定了三倍体翘嘴鲌诱导的适宜起始时间，最佳的静水压力，最佳的温度和最佳的化学物条件，建立了采用静水压力、结合温度休克及化学物诱导方法培育三倍体翘嘴鲌鱼类的方法。本发明建立的三倍体翘嘴鲌诱导方法操作流程清晰、实用性强，可高效诱导产生三倍体翘嘴鲌，三倍体翘嘴鲌的诱导效率可高达86％。利用本发明所述培育方法获得的三倍体翘嘴鲌生长速度增长更快，个体更大。本发明提供的三倍体翘嘴鲌培育方法为翘嘴鲌多倍体育种开辟了新的技术途径。

技术领域

本发明属于鲌亚科鱼类育种技术领域，具体涉及一种三倍体翘嘴鲌的培育方法。

背景技术

翘嘴鲌(Cultert alburnus)，隶属鲤形目，鲤科，鲌亚科，鲌属。翘嘴鲌肉质洁白细嫩，味道鲜美，营养价值较高，市场供不应求。性腺发育会影响了翘嘴鲌生长和肉质，降低鱼的商品质量。而且，随着翘嘴鲌养殖面积的扩增，逃逸到自然界中的概率极大增加，可能会给鱼类种质资源造成污染。一般认为三倍体鱼因染色体组成不平衡，性腺不能发育成熟，极大降低了性腺发育时期的生长停滞和鱼肉质量下降等不利影响，可以提高鱼类的生长速度、提高肉质质量。因此，开展三倍体翘嘴鲌的研究，培育出不育的三倍体群体，有助于提高翘嘴鲌的养殖产量和商品价值，也对于保护我国渔业种质资源至关重要，同时也对其他鲌亚科鱼类的育种有参考价值。

自然界中大部分鱼类是二倍体，二倍体鱼成熟卵子处于第二次减数分裂中期，卵内存在2组染色体，受精后，精子(1组染色体)入卵后，刺激卵中的1组染色体作为第二极体排出卵外，完成第二次减数分裂。此时受精卵内的1组染色体和精子带入的1组染色体结合，发育为正常的二倍体。如果在精子入卵而第二极体尚未外排时，对受精卵进行高温、低温、高压或化学药物等处理，阻止第二次减数分裂的进行，第二极体就不能排出卵外，则诱导产生出具有3组染色体的个体，称之为人工诱导三倍体。这种染色体组的组合方式是二组染色体来源于母本，一组染色体来源于父本。鱼类染色体具有较大的可塑性，易于进行多倍体的培育,并且大部分鱼没有性染色体，这是人工诱导三倍体的基础。

人工诱导三倍体鱼的方法主要有冷休克、热休克、静水压等物理方法，和采用化学物质(如秋水仙素)处理的化学方法。减数分裂的阻止是通过破坏分裂装置纺锤丝而使核分裂停止，或是通过阻碍细胞表层收缩环、沟的形成而使细胞质分裂停止而实现的。温度、压力等处理属于前者，而化学药物处理则属后者。大多数鱼类在精子入卵后8-10分钟，就完成第二次减数分裂，排出第二极体，如需获得三倍体，就要在完成第二次减数分裂以前进行诱导处理。无论采用哪一种方法诱导，都必须严格控制处理的起始时间和持续时间。如：美洲红点鲑，卵受精后15分钟用28℃高水温热休克处理10分钟，诱导出100％的三倍体，孵化率为42％。对胡子鲶而言，在25±1℃下卵受精5分钟后，放入5℃海水冷休克处理1小时，然后放入充气海水中培育，结果获得100％的三倍体仔鱼，如果处理时间在1.5小时以上，则造成100％的死亡率。用静水压诱导同样也需要严格掌握处理时间。以水晶彩鲫为例，受精卵的压力敏感期仅仅在受精后4～5分钟，在此之前为卵子启动期，施加压力会破坏卵子的激动和修整过程，造成发育受阻。其后为压力不应期，此时第二次减数分裂趋于明朗，压力对保留第二极体体失去作用。因此，为了获得三倍体水晶彩鲫，静水压诱导只能在受精后4～5分钟进行。

目前用温度休克、静水压、化学物质处理等办法来生产三倍体鱼在国内外也有不少报道。国际上也非常重视鱼类等水产养殖动物三倍体诱导技术的研究。经过各国科学家的不懈努力，已先后获得了多种鱼类的三倍体，如草鱼、鲤、鲫、虹鳟、香鱼、罗非鱼、鲑、黑绸、胡子鳃、泥鳅、牙鲆等，在草鱼、虹鳟、香鱼等部分鱼类已达到了批量生产的水平。三倍体鱼类具有很大的商业价值和开发潜力，既能提高经济效益，又能避免对天然资源的干扰，这是三倍体育种在基因工程技术不断向鱼类育种领域渗透的今天，仍具有强大生命力的主要因素之一。