[发明专利]基于赖氨酸的多肽在生物材料检测中的应用在审
申请号: | 202210655612.9 | 申请日: | 2022-06-10 |
公开(公告)号: | CN114908140A | 公开(公告)日: | 2022-08-16 |
发明(设计)人: | 李骏;汤小苏 | 申请(专利权)人: | 杭州诺莘科技有限责任公司 |
主分类号: | C12Q1/6806 | 分类号: | C12Q1/6806;C12Q1/6816;C07K7/08;C07K14/00 |
代理公司: | 杭州天勤知识产权代理有限公司 33224 | 代理人: | 高佳逸 |
地址: | 311121 浙江省杭州市钱塘*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 基于 赖氨酸 多肽 生物 材料 检测 中的 应用 | ||
1.基于赖氨酸的多肽在DNA链置换反应中的应用,其特征在于,所述基于赖氨酸的多肽由15~40个氨基酸组成,且其中赖氨酸的数量占比为40%~90%;
所述基于赖氨酸的多肽可通过以下任一方式加速DNA链置换反应,提高DNA检测的灵敏度,降低检测限:
a.所述基于赖氨酸的多肽与DNA链自组装形成多肽/DNA聚集体;
b.所述基于赖氨酸的多肽与DNA链共价合成多肽-DNA偶联聚合物。
2.根据权利要求1所述的应用,其特征在于,除赖氨酸外,所述氨基酸还包括组氨酸、苯丙氨酸、谷氨酸、谷氨酰胺、精氨酸中的至少一种。
3.根据权利要求2所述的应用,其特征在于,所述基于赖氨酸的多肽选自下列多肽中的至少一种:
KH15,氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示;
KF20,氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示;
KQ25,氨基酸序列如SEQ ID NO:3所示;
KKF30,氨基酸序列如SEQ ID NO:4所示;
KKKF40,氨基酸序列如SEQ ID NO:5所示。
4.根据权利要求1所述的应用,其特征在于,方式a中,所述多肽/DNA聚集体中,所述基于赖氨酸的多肽与所述DNA链的摩尔比为1~100:1。
5.根据权利要求1或4所述的应用,其特征在于,方式a中,所述多肽/DNA聚集体的制备方法包括步骤:
1)将所述基于赖氨酸的多肽溶于水中,得到多肽溶液,室温静置,使其自组装形成多肽聚集体;
2)将所述DNA链溶于水中,得到DNA链溶液;
3)将步骤1)得到的多肽聚集体和步骤2)得到的DNA链溶液混合于磷酸盐缓冲溶液中,得到所述多肽/DNA聚集体。
6.根据权利要求5所述的应用,其特征在于,步骤3)中,所述磷酸盐缓冲溶液的pH为7;
所述磷酸盐缓冲溶液中,磷酸根离子的浓度为50mM;
所述磷酸盐缓冲溶液中还含有150mM的NaCl。
7.一种提高DNA链置换反应速率、提高DNA检测的灵敏度、降低检测限的方法,其特征在于,采用以下任一方式修饰DNA链后进行DNA链置换反应:
A.将基于赖氨酸的多肽与DNA链自组装形成多肽/DNA聚集体,
B.将基于赖氨酸的多肽与DNA链共价合成多肽-DNA偶联聚合物;
所述基于赖氨酸的多肽由15~40个氨基酸组成,且其中赖氨酸的数量占比为40%~90%。
8.根据权利要求7所述的方法,其特征在于,除赖氨酸外,所述氨基酸还包括组氨酸、苯丙氨酸、谷氨酸、谷氨酰胺、精氨酸中的至少一种。
9.根据权利要求8所述的方法,其特征在于,所述基于赖氨酸的多肽选自下列多肽中的至少一种:
KH15,氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示;
KF20,氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示;
KQ25,氨基酸序列如SEQ ID NO:3所示;
KKF30,氨基酸序列如SEQ ID NO:4所示;
KKKF40,氨基酸序列如SEQ ID NO:5所示。
10.根据权利要求7所述的方法,其特征在于,方式A中,所述多肽/DNA聚集体中,所述基于赖氨酸的多肽与所述DNA链的摩尔比为1~100:1。
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