[发明专利]新型双特异性抗体及其用途

权利要求书

1.双特异性人IgG1抗体，其包含两种具有相同铰链区的Fc片段，所述铰链区的氨基酸序列为SEQ ID NO:1或SEQ ID NO:28并替换了天然人IgG1抗体恒定区的第216-230位序列；以及

所述两种Fc片段的CH2片段中均包含点突变L234F、L235E和P331S，其中CH2片段的氨基酸序列为抗体恒定区第231-340位的氨基酸序列；

其中所述抗体恒定区氨基酸位置按照EU numbering确定。

2.如权利要求1所述的双特异性人IgG1抗体，其中所述两种Fc片段包含能够确保重链异聚化的突变；优选地，一个Fc片段包含点突变S354C和T366W，另一个Fc片段包含点突变Y349C、T366S、L368A和Y407V。

3.如权利要求1或2所述的双特异性人IgG1抗体，其中所述两种Fc片段的N端分别融合识别不同抗原表位的单链抗体(scfv)。

4.如权利要求1或2所述的双特异性人IgG1抗体，其中一种Fc片段的N端融合单链抗体(scfv)，另一种Fc片段的N端融合Fab片段，所述单链抗体与所述Fab片段识别不同的抗原表位。

5.如权利要求1或2所述的双特异性人IgG1抗体，其中所述两种Fc片段的N端分别融合识别不同抗原表位的Fab片段；

优选地，识别不同抗原表位的Fab片段包含相同的轻链。

6.如权利要求5所述的双特异性人IgG1抗体，其中一种Fab片段包含天然的人IgG1抗体恒定区CH1片段，另一种Fab片段包含突变的人IgG1抗体恒定区CH1片段，所述突变的人IgG1抗体恒定区CH1片段包含点突变G137E、N203D和R214T中的任意1个、2个或3个，其中CH1片段的氨基酸序列为抗体恒定区第118-215位的氨基酸序列；

优选地，所述天然的人IgG1抗体恒定区CH1片段的氨基酸序列为SEQ ID NO:2，和/或所述突变的人IgG1抗体恒定区CH1片段的氨基酸序列为SEQ ID NO:30。

7.如权利要求1-6中任一项所述的双特异性人IgG1抗体，其中所述两种Fc片段的CH2片段的氨基酸序列均为SEQ ID NO:31。

8.如权利要求1-7中任一项所述的双特异性人IgG1抗体，其识别人免疫细胞表面抗原和肿瘤细胞表面抗原；

优选地，所述人免疫细胞表面抗原为CD3E。

9.药物组合物，其包含权利要求1-8中任一项所述的双特异性人IgG1抗体。

10.权利要求1-8中任一项所述的双特异性人IgG1抗体或者权利要求9所述的药物组合物在制备用于预防或治疗肿瘤的药物中的用途。