[发明专利]一种用于检测噻嗪酮的胶体金检测装置及其制备方法在审
申请号: | 202210658717.X | 申请日: | 2022-06-12 |
公开(公告)号: | CN115343470A | 公开(公告)日: | 2022-11-15 |
发明(设计)人: | 智军海;封冰;申屠献忠 | 申请(专利权)人: | 华测检测认证集团股份有限公司;华测检测认证集团北京有限公司 |
主分类号: | G01N33/553 | 分类号: | G01N33/553;G01N33/533 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 518101 广东省深圳市*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 用于 检测 噻嗪酮 胶体 装置 及其 制备 方法 | ||
1.一种用于检测噻嗪酮的胶体金检测装置,其特征在于,包括:胶体金微孔及检测试纸条,所述胶体金微孔包被有胶体金标记的噻嗪酮单克隆抗体;所述检测试纸条包括背衬、样品垫、硝酸纤维素膜及吸水垫,所述样品垫、所述硝酸纤维素膜及所述吸水垫沿均设置于所述背衬上,且所述样品垫及所述吸水垫分别搭接于所述硝酸纤维素膜相对的两端部,所述硝酸纤维素膜位于所述样品垫及所述吸水垫之间的区域沿朝向所述吸水垫的方向依次设有包被有噻嗪酮—卵清白蛋白复合物的检测线,以及包被有羊抗鼠IgG抗体的质控线。
2.根据权利要求1所述的用于检测噻嗪酮的胶体金检测装置,其特征在于,沿所述检测试纸条的层析方向,所述样品垫与所述硝酸纤维素膜的搭接重叠尺寸为2-4mm,所述吸水垫与所述硝酸纤维素膜的搭接重叠尺寸为2-4mm。
3.根据权利要求1所述的用于检测噻嗪酮的胶体金检测装置,其特征在于,所述背衬、所述样品垫、所述硝酸纤维素膜及所述吸水垫的宽度一致,且均为3.5-4.5mm。
4.根据权利要求1所述的用于检测噻嗪酮的胶体金检测装置,其特征在于,所述背衬为PVC材质,所述样品垫为玻璃纤维材质。
5.一种用于检测噻嗪酮的胶体金检测装置的制备方法,用于制备如权利要求1-4任意一项所述的用于检测噻嗪酮的胶体金检测装置,其特征在于,包括如下步骤:
S100:制备包被有胶体金标记的噻嗪酮单克隆抗体的胶体金微孔;
S200:制备检测线包被有噻嗪酮—卵清白蛋白复合物,及质控线包被有羊抗鼠IgG抗体的硝酸纤维素膜;
S300:提供背衬、样品垫及吸水垫,并将所述样品垫、所述硝酸纤维素膜及所述吸水垫设置于所述背衬上,且所述样品垫的一端搭接于所述硝酸纤维素膜相邻于所述检测线的一端,所述吸水垫的一端搭接于所述硝酸纤维素膜相邻于所述质控线线的一端。
6.根据权利要求5所述的用于检测噻嗪酮的胶体金检测装置的制备方法,其特征在于,步骤S100中还包括如下步骤:
S110:将质量分数为0.03%的氯金酸水溶液加热至沸腾,再向其中加入质量体积比为10%的柠檬酸三钠溶液,持续保持微沸20min,冷却后得到胶体金溶液;
S120:用浓度为0.1mol/L且pH值为9.0的硼酸盐缓冲液于搅拌条件下调节所述胶体金溶液pH值至6.8-7.2;
S130:将噻嗪酮单克隆抗体按质量浓度20~30mg/L加入至步骤S120所得的所述胶体金溶液中,搅拌均匀后室温静置20-30min,加入10%BSA至最终质量百分比浓度为1.0%-1.5%,静置10-20min后,在4℃及12000-15000r/min转速条件下离心处理,弃去上清液后,得到沉淀物;
S140:将所述沉淀物用胶体金重悬液重悬,得到噻嗪酮单克隆抗体-胶体金标记物混合液后置于4℃冰箱中备用;
S150:将所述噻嗪酮单克隆抗体-胶体金标记物混合液加入到微孔中,置于冷冻干燥机,冷阱温度为-70℃,预冻3h,再真空干燥24h,得到包被有冻干噻嗪酮单克隆抗体的胶体金微孔;
其中,步骤S110中所述氯金酸溶液中的氯金酸与所述柠檬酸三钠溶液中的柠檬酸三钠的质量为1:1.5-1:2;步骤S140中所述胶体金重悬液的与步骤S120中所述胶体金溶液的体积比为1:10-1:15,所述胶体金重悬液为pH值7.4-7.8且浓度为20mmol/L的PB缓冲液,并还含有3%蔗糖、2%BSA、0.5%Tween-20、0.1%聚乙二醇20000、0.05%ProClin 300;步骤S150中每个所述微孔中加入所述噻嗪酮单克隆抗体-胶体金标记物混合液的体积为50-60μL。
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