[发明专利]一种非创伤紫奇楠实生苗快速结香的内生菌、制备方法及其应用

权利要求书

1.一种非创伤紫奇楠实生苗快速结香的内生菌，其特征在于：内生菌的保藏号为：CGMCC No.40065；分类命名为:假可可毛色二孢Lasiodiplodia pseudotheobromae。

2.一种非创伤紫奇楠实生苗快速结香的内生菌的制备方法，其特征在于包括以下步骤：

1)制备奇楠沉香粉；

2)超声提取奇楠沉香粉，过滤提取液，得到内生菌混合液；

3)将内生菌液混合液置于固体培养基上培养，选菌得到内生菌种子液；

4)将内生菌种子液置于液体发酵罐内发酵，液体培养基采用分批补料的方式加入发酵罐中,前5天控制发酵罐内磷浓度为0.03-0.06g/L，5天后控制磷源小于0.01g/L再2培养2天，得到内生菌发酵液；

5)将内生菌发酵液稀释离心，得到非创伤紫奇楠实生苗快速结香的内生菌菌液。

3.权利要求2所述的非创伤紫奇楠实生苗快速结香的内生菌的制备方法，特征在于：步骤1)所述的奇楠沉香粉的制备方法为：奇楠所产沉香经刨片机刨成小于1毫米的薄片、在60mg/L浓度的臭氧中消毒2小时，在无菌环境中用万能粉碎机粉碎过0.5mm筛后在液氮冷冻研磨机冷冻10分钟，粉碎4分钟，得到预处理奇楠沉香粉。

4.权利要求2所述的非创伤紫奇楠实生苗快速结香的内生菌的制备方法，特征在于：所述固体培养基的配方为：麸皮40％、豆饼粉30％、紫奇楠白木15％、玉米碎粒15％，外加组分和接种量(/kg基质)为蔗糖5g、蛋白胨15g、NH₄NO₃3.00 g、KH₂PO₄3 g、CaSO₄ 3g、MgSO₄1g，维生素PP10mg、蒸馏水500g。

5.权利要求2所述的非创伤紫奇楠实生苗快速结香的内生菌的制备方法，特征在于：所述液体为牛肉蛋白胨8-10g,酵母粉1.5-3g,葡萄糖4-6g,K₂HPO₄ 0.2-0.3g,蚁酸0.1-0.2g,CaSO₄0.5g，FeSO₄ 0.05g,MgSO₄,0.05g，NaCl 0.05g,无菌水1L。

6.非创伤紫奇楠实生苗快速结香的内生菌在紫奇楠实生苗非创伤的条件下诱导快速结香。

7.根据权利要求所述的非创伤紫奇楠实生苗快速结香的内生菌在紫奇楠实生苗非创伤的条件下诱导快速结香，其特征在于：将奇楠内生菌注射液通过专用奇楠内生菌注射装置注射到一年生以上紫奇楠实生苗中，经过两年可达到整株结香。