[发明专利]玉米双调控模块在调控植物生长和抗病平衡中的应用有效

申请号：	202210674892.8	申请日：	2022-06-15
公开（公告）号：	CN114908117B	公开（公告）日：	2023-05-16
发明（设计）人：	苟明月;于延文;孙景凡;张同祥;李见坤;母小焕;徐莉萍;汤继华	申请（专利权）人：	河南农业大学
主分类号：	C12N15/82	分类号：	C12N15/82;C12N15/113;A01H6/46;A01H5/00
代理公司：	郑州豫原知识产权代理事务所(普通合伙) 41176	代理人：	王士群
地址：	450002 河***	国省代码：	河南;41
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摘要：
搜索关键词：	玉米调控模块植物生长抗病平衡中的应用
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【权利要求书】：

1.玉米双调控模块在调控植物生长和抗病平衡中的应用，其特征在于，所述玉米双调控模块包括ZmTBF1a基因的启动子和uORF序列，即pZmTBF1a:uORF^ZmTBF1a，其核苷酸序列参见SEQ ID No.1；所述玉米双调控模块还包括ZmTBF1b基因的启动子和uORF序列，即pZmTBF1b:uORF^ZmTBF1b，其核苷酸序列参见SEQ ID No.2；

所述应用包括将ZmTBF1a连接在pZmTBF1a:uORF^ZmTBF1a的下游，ZmTBF1b连接在pZmTBF1b:uORF^ZmTBF1b的下游；ZmTBF1a核苷酸序列参见SEQ ID No.3，ZmTBF1b核苷酸序列参见SEQ IDNo.4；

其中，所述植物是玉米；

所述抗病是指抗由多堆柄锈菌、新月弯孢菌引起的病害。

2.根据权利要求1所述的玉米双调控模块在调控植物生长和抗病性中的应用，其特征在于，从玉米DNA中扩增uORF^ZmTBF1元件和对应的ZmTBF1启动子序列，利用无缝克隆的方法分别克隆到植物表达载体pCAMBIA3301中。

3.根据权利要求2所述的玉米双调控模块在调控植物生长和抗病性中的应用，其特征在于，所述扩增uORF^ZmTBF1元件和对应的ZmTBF1启动子序列的引物如下：

ZmTBF1a-3301：

Forward：5’-atgaccatgattacgaattcCATCGCCATCCATTTAAACATT-3’

Reverse：5’-taccctcagatctaccatggCCCTCGCCGCCGGCTATGTATA-3’

ZmTBF1b-3301：

Forward：5’-atgaccatgattacgaattcGCTCGCTCGATCGTCCGCCCTT-3’

Reverse：5’-taccctcagatctaccatggCTCTCGCTCGGCGCCGACGATT-3’。

4.根据权利要求2所述的玉米双调控模块在调控植物生长和抗病性中的应用，其特征在于，利用EcoRI和NcoI限制性内切酶线性化pCAMBIA3301载体，利用无缝克隆技术将扩增的玉米双调控模块序列连接到该植物表达载体中。