[发明专利]一种解离液及其制备方法和应用

说明书

本发明涉及医学技术领域，尤其涉及一种解离液及其制备方法和应用。该解离液由缓冲液、解离剂、蛋白保护剂、蛋白稳定剂和防腐剂组成；所述解离剂包括Danazol、ANS盐和孕酮。实验表明，解离液能够将与CBG和白蛋白结合的全部皮质醇释放出来，与液质/标准盘的相关性达到0.995以上，说明，利用本发明解离液对样本进行解离能够更准确的反应出样本中皮质醇的总含量，大大提高临床检测的准确性。

技术领域

本发明涉及医学技术领域，尤其涉及一种解离液及其制备方法和应用。

背景技术

皮质醇是在肾上腺皮质的束状带中由胆固醇逐步合成的，是一种糖皮质激素类激素，当机体在应激反应的条件下，胆固醇会经肾上腺转变为皮质醇，且以游离的形式分泌到血液中，且这种产生和释放具有昼夜节律性，所以皮质醇可作为肾上腺皮质功能的指标；此外，皮质醇还具有增加血糖，抑制免疫系统，并协助脂肪，蛋白质和碳水化合物的代谢的作用。

但是，存在于血液中的皮质醇以游离形式存在的只占总皮质醇的4％左右，游离皮质醇可以发挥本身的生物活性，最后从肾脏过滤到尿液中；在血液中皮质醇存在的主要形式是结合状态，而结合状态中主要是与糖皮质类固醇结合蛋白相结合，少量也会与白蛋白结合；结合状态的皮质醇无生物活性，不会被肝细胞破坏，也不能从肾小球滤过，需要从蛋白上解离下来才能发挥其作用。因此检测血液中总皮质醇的关键点在于将所有结合状态的皮质醇从相应的CBG和白蛋白上解离出来。

目前市面上免疫检测试剂盒中选用的解离剂大都是一种与皮质醇类似的小分子药物，例如只有Danazol的解离剂和只有ANS盐(8-苯胺-1-萘磺酸半镁盐水合物)的解离剂。而大部分皮质醇在血液中的存在形式为结合在白蛋白和糖皮质类固醇结合蛋白上的状态，而每种解离剂一般只与一种蛋白有着高亲和力，所以当只含有一种解离剂的时候就会导致皮质醇不能完全释放，从而使得最后皮质醇的总含量检测不准确。

发明内容

有鉴于此，本发明提供了一种解离液及其制备方法和应用，该解离液可将与CBG和白蛋白结合的全部皮质醇释放出来，从而大大提高临床检测的准确性。

为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：

解离液，由缓冲液、解离剂、蛋白保护剂、蛋白稳定剂和防腐剂组成；

所述解离剂包括Danazol、ANS盐和孕酮。

Danazol是人工合成的一种甾体杂环化合物，有蛋白同化作用和抗孕激素作用，本身与皮质醇的化学结构相似，能够与白蛋白和糖皮质类固醇结合蛋白(CBG)结合从而将皮质醇从白蛋白和CBG上释放出来，并且其与糖皮质类固醇结合蛋白的结合能力低于皮质醇。

Danazol的结构如下：

ANS盐为一种复合释放剂，与CBG的结合能力较强，可使皮质醇从结合蛋白上解离出来，其结构如下：

孕酮又名黄体酮，结构如式III所示，是由卵巢黄体分泌的一种天然孕激素，正常人体血清中的含量低于皮质醇的含量高，与CBG结合的能力为皮质醇的4-5倍，使结合状态的皮质醇转变为游离状态。

本发明解离液由Danazol、0ANS盐和孕酮三种解离剂和缓冲液、蛋白保护剂、蛋白稳定剂和防腐剂组成，各组分合理搭配，所得解离液能够将与CBG和白蛋白结合的全部皮质醇释放出来，从而从而更准确的反应出血液中皮质醇的总含量，提高临床检测的准确性。

一些实施方案中，所述解离液由缓冲液和如下浓度的组分组成：

0.2-0.5wt％Danazol，0.1-0.3wt％ANS盐，0.1-0.5mg/ml孕酮、0.5-2wt％蛋白稳定剂、0.1-5wt％蛋白保护剂和0.1-5wt％防腐剂。