[发明专利]一种利用SSR标记鉴定红姜花与白姜花种间杂交F1

权利要求书

1.一种利用SSR标记鉴定红姜花与白姜花种间杂交F₁杂种真实性的方法，其特征在于，包括以下步骤：

S1.分别提取亲本红姜花、白姜花及其种间杂交F₁代杂种的基因组DNA；

S2.SSR毛细管电泳分析：分别以步骤S1提取的基因组DNA为模板，采用SSR标记引物HcgSSR115和/或HcgSSR1951进行SSR-PCR扩增检测，采集扩增产物的特征峰；所述HcgSSR115的引物序列如SEQ ID NO.1～2所示，HcgSSR1951的引物序列如SEQ ID NO.3～4所示；

S3.杂种真实性的鉴定：将步骤S2中种间杂交F₁代杂种的特征峰与亲本的特征峰进行比对，若同时具有亲本特征峰则为真实杂交种。

2.根据权利要求1所述方法，其特征在于，步骤S1中提取亲本和其种间杂交F₁代杂种的幼嫩叶片。

3.根据权利要求1所述方法，其特征在于，在步骤S1中对提取的基因组DNA进行1％的琼脂糖凝胶电泳，检测DNA纯度。

4.根据权利要求1所述方法，其特征在于，所述标记引物的上游引物5’尾端接有FAM荧光标记。

5.根据权利要求1所述方法，其特征在于，步骤S2中SSR-PCR扩增的体系(25μL)：50ng·μL^-1模板DNA 1.0μL，10μM dNTP(mix)0.5μL，10×Taq Buffer(with MgCl₂)2.5μL，10mM上游引物和下游引物各1μL，5U·μL Taq酶0.2μL，超纯水19.8μL。

6.根据权利要求1所述方法，其特征在于，步骤S2中SSR-PCR扩增反应程序：95℃预变性5min；94℃变性30s，55℃退火30s，72℃延伸30s，35个循环；72℃修复延伸10min。

7.SEQ ID NO.1～4所示的SSR标记引物HcgSSR115和/或HcgSSR1951在鉴定红姜花与白姜花种间杂交F₁杂种真实性中的应用。

8.一种鉴定红姜花与白姜花种间杂交F₁杂种真实性的试剂盒，其特征在于，含有SSR标记引物HcgSSR115和/或HcgSSR1951，所述引物序列依次如SEQ ID NO.1～4所示。

9.根据权利要求8所述试剂盒，其特征在于，还包含SSR-PCR扩增所需试剂。

10.根据权利要求8所述试剂盒，其特征在于，还包含提取样本DNA所需的试剂。