[发明专利]一种间充质干细胞外泌体及用于免疫细胞培养的用途

说明书

本发明公开了一种间充质干细胞外泌体及用于免疫细胞培养的用途。本发明提供了一种人脐带间充质干细胞分泌的外泌体，通过2‑氨基阿糖腺苷对人脐带间充质干细胞干预培养获得。体外和体内活性研究均表明，该外泌体可以增强CIK细胞对肿瘤细胞的杀伤活性，效果显著优于未经2‑氨基阿糖腺苷干预培养的人脐带间充质干细胞分泌的外泌体。因此，本发明提供的外泌体可用于相关体外培养基或体内抗肿瘤药物。

技术领域

本发明属于生物领域，涉及一种间充质干细胞外泌体及用于免疫细胞培养的用途。

背景技术

作为干细胞临床治疗最常用的细胞类型之一，间充质干细胞(MSCs)是基质来源的成体干细胞，主要存在于骨髓、牙髓、脂肪、脐带等结缔组织和器官间质中。研究发现MSCs的作用机制是由于其旁分泌因子和外泌体/微囊泡的作用，其中可能主要由囊泡中包含的旁分泌因子介导。细胞外囊泡(EV)目前被认为是通过生物活性脂质、蛋白质和RNA转移进行细胞间通讯的重要信使。外泌体直径为30～150nm，当多泡体与细胞膜融合时释放到细胞外，外泌体富含许多生物活性分子，如脂质、蛋白质、mRNA、转移RNA(tRNA)、长链非编码RNA(lncRNA)、微小RNA(miRNA)和线粒体DNA(mtDNA)。外泌体被释放到细胞外，可以被微环境中的靶细胞吸收，也可以通过生物体液运送到远处。目前公认的是，在多种间充质干细胞中，脐带间充质干细胞(hUC-MSCs)相对而言是外泌体较为理想的来源。

近年来，肿瘤免疫治疗在多种恶性肿瘤中显示了确切的临床疗效，主要包括免疫检查点抑制剂和免疫细胞治疗。细胞免疫治疗通过回输激活的免疫细胞介导抗肿瘤免疫反应，以达到治疗肿瘤的目的。与传统的肿瘤治疗手段相比，细胞免疫治疗更注重个体化，同时还能产生持久的抗肿瘤免疫记忆。CIK细胞是众多免疫细胞中的一种。

由于细胞免疫治疗的效果依赖回输免疫细胞对肿瘤细胞的杀伤活性，研究者们花费了很多精力在提高免疫细胞对肿瘤细胞的杀伤活性方面。

发明内容

本发明为了克服现有技术的不足，提供一种间充质干细胞外泌体及用于免疫细胞培养的用途，以提高CIK细胞对肿瘤细胞的杀伤活性。

本发明技术方案如下：

一种间充质干细胞外泌体，该外泌体为2-氨基阿糖腺苷干预培养的人脐带间充质干细胞分泌的外泌体。

上述间充质干细胞外泌体用于制备增强免疫细胞对肿瘤细胞杀伤活性的培养基的用途，所述免疫细胞为CIK细胞，所述肿瘤细胞为K562肿瘤细胞。

上述间充质干细胞外泌体用于制备增强免疫细胞对肿瘤细胞杀伤活性的药物的用途，所述免疫细胞为CIK细胞，所述肿瘤细胞为K562肿瘤细胞。

有益技术效果：

本发明提供了一种人脐带间充质干细胞分泌的外泌体，通过2-氨基阿糖腺苷对人脐带间充质干细胞干预培养获得。体外和体内活性研究均表明，该外泌体可以增强CIK细胞对肿瘤细胞的杀伤活性，效果显著优于未经2-氨基阿糖腺苷干预培养的人脐带间充质干细胞分泌的外泌体。因此，本发明提供的外泌体可用于相关体外培养基或体内抗肿瘤药物。

附图说明

图1为流式检测hUC-MSCs表面标志物CD34、CD45、CD73、CD90、CD105、HLA-DR的表达，显示CD73、CD90、CD105阳性表达，CD34、CD45、HLA-DR阴性表达。

图2中A为外泌体透射电镜观察结果，外泌体呈类圆形，直径约100nm；B为外泌体标志蛋白表达检测，各组CD9、CD63和CD81蛋白表达基本一致。

图3为各组裸鼠移植瘤剥离后比较大小。

具体实施方式

下面通过具体的实施例详细介绍本发明实质性内容，但不能以此限定本发明的保护范围。

一、试验材料