[发明专利]一种苦参生物碱、苦参提取物制备及抗炎、止痒应用

权利要求书

1.一种苦参提取物，该提取物是采用如下过程制备的：

(1)将干燥苦参茎粉碎；

(2)粉碎后的苦参茎用乙醇-水进行渗漉提取；

(3)合并减压浓缩步骤(2)所得的提取液，得到浸膏；

(4)用水溶解步骤(3)所得的浸膏，得到混悬液，用HCl调节pH至弱酸性；

(5)步骤(4)所得的混悬液中加入氯仿使分层；

(6)将步骤(5)所得的水层用NH₃·H₂O调pH至弱碱性，再用氯仿萃取，得到总碱浸膏；

(7)将步骤(6)所得的总碱浸膏经硅胶柱色谱分离，用氯仿-甲醇进行梯度洗脱，获得若干个馏分；

(8)构建2,4-二硝基氯苯诱导的正常人皮肤成纤维细胞(NHDF)损伤模型，评价步骤(7)所得的各馏分的保护活性；

(9)将步骤(8)中具有最佳保护活性的馏分经大孔树脂分离，进一步用乙醇-水洗脱，进一步得到不同部位的若干个馏分；

(10)基于前述构建的2,4-二硝基氯苯诱导的正常人皮肤成纤维细胞(NHDF)损伤模型，评价步骤(9)所得的各馏分的保护活性；

(11)将步骤(10)评价出的、具有最佳保护活性的部位的馏分作为苦参提取物；

其中，步骤(2)中所采用的乙醇-水为25％-35％的乙醇；步骤(4)中所述的弱酸性为pH＝5.5-6.5，优选为pH＝5.7-6.3；步骤(6)中所述的弱碱性为pH＝9.5-10.5，优选为pH＝9.7-10.3。

2.一种苦参生物碱类化合物的制备方法，该方法包括：

A、按权利要求1所述的方法制备苦参提取物；

B、取步骤A中苦参提取物，经反复硅胶色谱柱、氯仿-甲醇梯度洗脱，再经ODS柱色谱及HPLC分离纯化，得到如式1、式2、式3、式4、式5、式6以及式7所示的苦参生物碱类化合物：

3.一种苦参生物碱类化合物的组合物，该组合物包括根据权利要求2所述方法制备的如式1、式2、式3、式4、式5、式6以及式7所示的化合物；其中，在所述的组合物中，式1、式2、式3、式4、式5、式6、式7所示的化合物的质量比为1:1-100:1-100:1-100:1-100:1-100:1-100。

4.如权利要求3所述的组合物，其中，在所述的组合物中，进一步含有如权利要求1所述的苦参提取物，该组合物中，式1、式2、式3、式4、式5、式6、式7所示的化合物与所述苦参提取物的质量比为1:1-100:1-100:1-100:1-100:1-100:1-100:1-500，优选的质量比为1:1-50:1-50:1-50:1-50:1-50:1-50:1-250，更优选的质量比为1:1-3:1-3:1-3:1-3:1-3:1-3:80-120。

5.如权利要求1所述的苦参提取物或如权利要求3-4之一所述的组合物在制备抗炎、止痒类化妆品或药品中的应用。

6.如权利要求5所述的应用，其中，所述的应用是通过提高NHDF细胞活力、抑制NHDF细胞炎性细胞因子分泌、抑制NHDF细胞内ROS含量、和/或抑制NHDF细胞NF-κB/MAPKs信号通路激活而实现的。

7.如权利要求6所述的应用，其中，所述的抗炎、止痒类化妆品或药品为外用制剂，其形式为膏剂、乳剂、慕斯、喷剂、或液体制剂。

8.如权利要求5所述的应用，其中，止痒是指抑制或缓解由皮炎、湿疹、荨麻疹、皮肤干燥症、或浅部真菌感染之类皮肤病所引起的痒症。

9.如权利要求7所述的应用，其中，所述的外用制剂为相应的缓控释剂，其形式为用于涂抹给药的包合物、脂质体、微球、纳米粒、或乳剂。

10.如权利要求5所述的应用，其中，所述的止痒药品为复方制剂，其包括辅料以及如权利要求1所述的苦参提取物或如权利要求3-4之一所述的组合物。