[发明专利]一种具有放疗敏感和放疗耐受特性的原代宫颈癌细胞系及其构建方法和应用

说明书

本发明提供一种具有放疗敏感和放疗耐受特性的原代宫颈癌细胞系及其构建方法和应用，所述放疗耐受细胞系名称为UCR7，放疗敏感细胞系为UCS19，保藏于中国典型培养物保藏中心，地址：中国，武汉，武汉大学，UCR7保藏编号CCTCC NO:C202286，UCS19保藏编号CCTCC NO:C2022127。本发明放射耐受的宫颈癌条件性重编程细胞系不仅可以保留患者肿瘤放射耐受的生物学特征，作为放射耐受宫颈癌相关机制的基础研究的细胞模型，还可应用于二代生物标本库构建和精准医学，为患者提供更加个体化的治疗方案，预测患者治疗反应及预后，提高肿瘤治疗效果。

技术领域

本发明涉及生物医药技术领域，具体是一种具有放疗敏感和放疗耐受特性的原代宫颈癌细胞系及其构建方法和应用。

背景技术

宫颈癌是女性第四大恶性肿瘤,其发病率约占女性癌症患者的 7％,宫颈癌在发展中国家的负担远高于发达国家，中国宫颈癌患者约占全世界宫颈癌患者1/3。目前宫颈癌的治疗手段包括手术、放疗、化疗和免疫治疗等。其中放射治疗为ⅡB到ⅣA期患者主要的根治性治疗手段及ⅠA到ⅡB期患者的可选根治性治疗，约30％左右患者出现放疗后复发，其中放疗野内复发的比例占所有复发患者的50％以上，且放疗后复发患者往往预后不佳，而导致放疗后复发的主要原因在于肿瘤细胞的自身的耐受性。目前与放疗耐受相关研究的肿瘤细胞系与肿瘤基因表达相似度较差，且不能满足放疗耐受的研究目的。

既往研究多为基于商品化细胞系的体内外实验，商品化细胞系具有同源性且形态和表型均一，易于在体外扩增。然而近年来随着二代测序的深入发展，通过比较部分癌种的癌症基因组图谱(the cancer genome atlas,TCGA)、人源性组织异种移植模型(patient-derived xenografts,PDX)和细胞系转录组表达差异发现，PDX作为人类疾病替代模型与TCGA数据库具有较高的基因表达相似性，而细胞系与TCGA之间的基因表达相似度较低，可见细胞系基因表达在不同癌种间特异性较差且与肿瘤真实表达谱偏离。除此之外目前商品化细胞系建立时间较久，无放疗处理的背景，难以反应放射耐受患者的肿瘤生物学特征。

发明内容

针对上述现有技术的不足，本发明提供一种具有放疗敏感和放疗耐受特性的原代宫颈癌细胞系及其构建方法和应用，通过条件重编程细胞技术建立放疗耐受和敏感的原代细胞系，该原代细胞系更好的保留了患者肿瘤的生物学特征，可用于在放疗耐受研究领域的生理病理学研究、发病机理及治疗药物筛选研究中的应用。

本发明提供的技术方案：一种具有放疗敏感和放疗耐受特性的原代宫颈癌细胞系，所述细胞系为放射耐受宫颈癌原代细胞名称USR7，和放射敏感宫颈癌原代细胞为UCS19，保藏于中国典型培养物保藏中心，地址：中国，武汉，武汉大学，USR7保藏编号 CCTCCNO:C202286，UCS19保藏编号CCTCC NO:C2022127，保藏日期：2022年5月12日。

本发明提供的技术方案：一种具有放疗敏感和放疗耐受特性的原代宫颈癌细胞系在制备宫颈癌细胞模型或动物肿瘤模型中的应用。

本发明提供的技术方案：一种具有放疗敏感和放疗耐受特性的原代宫颈癌细胞系在筛选或制备宫颈癌治疗药物中的应用。

本发明提供的技术方案：一种具有放疗敏感和放疗耐受特性的原代宫颈癌细胞系在用于放疗敏感和放疗耐受研究领域的生理病理学研究和发病机理研究中的应用。

本发明提供的技术方案：一种具有放疗敏感和放疗耐受特性的原代宫颈癌细胞系的构建方法，包括如下步骤：

(1)放射耐受宫颈癌CR细胞系标本取材于接受过放射治疗且 12个月内发生放射野内复发的宫颈癌患者，取材的时间点在放疗复发后，但尚未接受再次肿瘤治疗，放射敏感的宫颈癌CR细胞系取材于接受过放射治疗且12个月内发生放射野内及野外复发的宫颈癌患者，取材的时间点为初治患者未接受抗肿瘤相关治疗之前；